Introduction of cry1Ab gene into cotton (Gossypium hirsutum) enhances resistance against Lepidopteran pest (Helicoverpa armigera) | La introducción de genes cry1Ab en algodón (Gossypium hirsutum) mejora la resistencia contra las plagas de lepidópteros (Helicoverpa armigera)

الأسبانية؛ قشتالية. Un importante avance en biotecnología vegetal ha sido el desarrollo de técnicas para transformar genes provenientes de fuentes no relacionadas en cultivos de importancia comercial para desarrollar resistencia contra plagas de insectos. Se transformó el cultivar local de algodón MNH-93 por medio de la cepa C58C sub1 de Agrobacterium tumefaciens mediante bombardeo con partículas de tungsteno. La cepa de Agrobacterium contenía el vector binario recombinante pKMAB que albergaba cry1Ab bajo el promotor 35S. Se utilizó el gen neomicina fosfotransferasa (nptII) a una concentración de 50 mg/L como marcador genético. La eficiencia de transformación se mantuvo en un 0,26%. Los transformantes primarios se analizaron para la integración y expresión del gen mediante PCR, Southern blotting y Western dot blot. El número de copias del gen se determinó por Southern blot a fin de conocer los sitios de integración del cry1Ab. Se cuantificó la proteína Bt producida en las plantas transgénicas utilizando el software ImageQuant, que varió de 0,00 hasta 1,35% de las proteínas totales. Las semillas de plantas positivas obtenidas a partir de la progenie T0 se crecieron en condiciones de invernadero y de campo para evaluar su comportamiento en el campo. Se realizaron ensayos de biotoxicidad de la hoja para determinar la eficacia del gen introducido. Los resultados mostraron que las líneas transgénicas en la progenie T1 tienen un nivel apreciable de resistencia (40-60%) contra las plagas de lepidópteros, tanto en condiciones de invernadero como de campo.

إنجليزي. The significant breakthrough in plant biotechnology is the development of techniques to transform genes from unrelated sources into commercially important crop plants to develop resistance against insect pests. A local cotton cultivar MNH- 93 was transformed through Agrobacterium tumefaciens strain C58C sub1 assisted by bombardment with tungsten particles. The Agrobacterium strain contained the recombinant binary vector pKMAB harboring cry1Ab under 35S promoter. Neomycin phosphotransferase (nptII) gene was used as a selectable marker at a concentration of 50 mg/L. The transformation efficiency remained 0.26%. The primary transformants were analyzed for transgene integration and expression through PCR and Southern Blotting and Western dot blot. The gene copy number was determined by Southern analysis in order to find out the cry1Ab integration sites. The Bt protein being produced in the transgenic plants was quantified using ImageQuant software, which ranged from 0.00 to 1.35% of the total protein. The positive plant seeds obtained from T0 progeny were further raised under greenhouse and field conditions to evaluate their field performance. Leaf biotoxicity assays were performed to determine the efficacy of introduced gene. The results showed that transgenic lines in T1 progeny have appreciable level of resistance (40-60%) against lepidopteran pests in both green house and field conditions.