Ectopic osteomyelogenous response to demineralized bone matrix implant in busulphan treated mice | Resposta osteomielogênica ectópica ao implante de matriz óssea desmineralizada em camundongos tratados com bussulfano

Swiss female mice (25-30 g; n = 100) were four times treated i.p. with busulphan (20 mg/kg), with 15 day interval between doses. Blood was collected by retroorbital puncture from treated and non treated control animals (n = 15) for white blood cell count, hematocrit and hemoglobin evaluation, before treatment and on 30th, 60th, 90th days following<br />the first dose of the drug. On day 60 both treated (60 survived animals) and non treated (n = 15) animals received intermuscular implant of demineralized bone matrix (DBM-10 mg). All of them were killed 30 days after implant (90th day post busulphan initial dose) for histological analysis of esternal bone marrow (EBM) and ectopic osteomyelogenous<br />response to the DBM implant. Thirty days after the first dose of busulphan, leukopenia and drop in the granulocyte, lymphocyte and monocyte numbers were observed. The hematocrit and hemoglobin rate decreased on 60th day. Histologycal analysis of the EBM of the test group showed hypocellularity, sinusoid capilar distention and reduction in<br />megakaryocyte numbers. Control animals showed 100% positive response to DBM implant with the formation of metaplastic plaques made of bone trabeculae forming cavities filled with haematopoietic cells. 46.7% of the test animals had positive osteomyelogenous response, similar to that of the control groups, except for hypocellularity and more adipocytes; 25% displayed late and incomplete response with predominance of cartilaginous component, less neoformed bone tissue and absence of haematopoietic cells; the remaining 28.3% did not respond at all.

Camundongos Swiss, fêmeas, (25-30 g; n = 100) receberam 4 injeções de bussulfano (20 mg/kg, ip) a intervalos de 15 dias (n = 100). Antes do tratamento e após 30, 60 e 90 dias, os animais deste e de um grupo controle (n = 15) foram avaliados quanto ao leucograma, taxa de hemoglobina e hematrócito por meio do sangue colhido por punção retroorbital. Sessenta dias após o início do tratamento, 60 animais sobreviventes do grupo tratado e 15 animais do grupo controle receberam implantes intermuseulares de matriz óssea desmineralizada (MOD-10 mg). No 90s dia (30 dias após o implante) foram sacrificados para exame histológico da medula óssea esternal (MOE) e da resposta osteomielogênica ao implante de MOD. Trinta dias após o início do tratamento observou-se leucopenia, com diminuição do número de granulócitos, linfócitos e monócitos nos animais que receberam bussulfano. O hematócrito e a taxa de hemoglobina apresentaram-se diminuídos no 609 dia. O exame histológico da MOE do grupo tratado revelou hipocelularidade, dilatação dos capilares sinusóides e redução do número de megacariócitos (50%). Os animais controle apresentaram 100% de resposta positiva ao implante de MOD, havendo formação de placas metaplásicas compostas por trabéculas ósseas contendo cavitações preenchidas por células hematopoiéticas. Em 46,7% dos animais tratados observou-se resposta osteomielogênica semelhante à do grupo controle, mas com hipocelularidade e maior componente de adipócitos; 25% apresentaram resposta osteomielogênica tardia e incompleta com menor componente ósseo, maior componente cartilaginoso e ausência de células hematopoiéticas; nos 28,3% restantes a resposta foi negativa.