Etude sur la transformation génétique du caféier par électroporation et méthode biolistique
1994
Van Boxtel, Jos
Cette étude avait deux objectifs : l'amélioration des techniques de régénérations du caféier et la définition des facteurs agissant sur l'efficacité des méthodes de transfert direct de gènes. Un procédé amélioré de l'embryogenèse somatique haute fréquence (HFSE) de plusieurs génotypes de caféiers a été mis au point. Il permet d'obtenir des taux importants de protoplastes et d'offrir les meilleures perspectives pour la transformtion génétique du caféier. L'électroporation et la régénération semble appropriée pour l'étude d'expression génique transitoire, mais elle est moins prometteuse pour une expression stable. Pour la méthode biolistique (canon à particules) les meilleurs résultats ont été obtenus chez Coffea arabica à l'aide de plasmides portant le promoteur EF1alpha-A1 d'Arabidopsis thaliana. L'effet des particules de tungstène sur l'induction des cals et le devenir des cellules exprimant le gène GUS après bombardement des feuilles a été décrit et les conséquences pour leur utilisation étudiée. Le glufomisate (herbicide) semble être le meilleur révélateur de tissus de caféiers transformés de façon stable. Eviter l'oxydation phénolique semble être d'une importance promordiale pour l'établissement de la transformation génétique du caféier
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