“Caracterización molecular y germinación simbiótica de hongos endófitos de raíces de Cyrtochillum gyriferum y Elleanthus amethystiniodes Garay que se desarrollan en Hedyosmum cumbalense.”

La relación simbiótica existente entre los microorganismos endófitos y las orquídeas, otorga beneficios para la germinación de las semillas. Cyrtochillum gyriferum y Elleanthus amethystiniodes Garay son especies de orquídeas epífitas pertenecientes a los bosques Andinos del Ecuador, han sido poco estudiadas, por lo que no hay información disponible sobre su cuidado y conservación, esta situación es preocupante, por la progresiva pérdida en la diversidad florística en el Ecuador. En el presente estudio se aislaron e identificaron molecularmente hongos endófitos cultivables presentes en las raíces de las orquídeas en estudio, para ello, se usaron métodos de aislamiento de hongos endófitos y la identificación molecular se realizó mediante secuenciación de la región ITS1 - ITS4 amplificada por PCR. Los productos obtenidos fueron analizados por BLAST en base a las secuencias obtenidas del NCBI. Además, se determinó la composición e índice de diversidad de las comunidades de hongos endófitos que colonizan las raíces de orquídeas epífitas mediante la separación electroforética de los amplicones generados, de la región ITS1 e ITS4, en geles de poliacrilamida con gradiente desnaturalizante (DGGE). Finalmente se evaluó el efecto fito-estimulante de los hongos endófitos cultivables aislados, en la germinación simbiótica de semillas de las mismas especies de orquídeas. Los resultados de la secuenciación mostraron que los hongos aislados pertenecen a los siguientes grupos taxonómicos: Ascomycota, Meyerozyma guilliermondii, Debaryomyces, Zygomycete, fungal y fungal endophyte. En cambio, la diversidad de las comunidades de hongos endófitos encontrada fue baja, en ambas especies en estudio. El ensayo de germinación simbiotica en Elleanthus amethystiniodes y Cyrtochillum gyriferum no evidencio efecto estimulante en ninguno de los aislados fúngicos, siendo significativamente superior el control positivo en medio Phytamax e incluso el control negativo en medio avena agar.

symbiotic relation between endophyte microorganisms and orchids provides benefits for seed germination. Cyrtochillum gyriferum y Elleanthus amethystiniodes Garay are species of epiphytic orchids belonging to the Andean forests of Ecuador and have been little studied, so there is no information available on their care and conservation. This situation is worrying about the progressive loss of floristic diversity in Ecuador. In the present study, the molecules of the cultivable endophytic fungi present in the roots of the orchids were isolated and identified. For this, endophytic fungus isolation methods were used. Molecular identification was enhanced by sequencing of the ITS1-ITS4 region amplified by PCR. The products obtained were analyzed by BLAST based on the sequences obtained from the NCBI. In addition, the composition and index of the diversity of the endophytic fungal communities that colonize the roots of epiphytic orchids was determined by electrophoretic separation of the amplicons generated from the ITS1 and ITS4 region in polyacrylamide gels with denaturing gradient (DGGE). Finally, the phyto-stimulating effect of isolated cultivable endophytic fungi in the symbolic germination of seeds of the same orchid species was evaluated. The sequencing results showed that isolated fungi belong to the taxonomic groups: Ascomycota, Meyerozyma guilliermondii, Debaryomyces, Zygomycete, fungal and fungal endophyte. In contrast, the diversity of the endophytic fungal communities found was low in both study species. The symbiotic germination test in Elleanthus amethystiniodes and Cyrtochillum gyriferum showed no stimulating effect in any of the fungal isolates, the positive control in Phytamax medium and even the negative control in oatmeal being significantly higher.

Ingeniero Agrónomo

Cuenca