Desarrollo y evaluación de un candidato vacunal para IBD producido en plantas: una alternativa a las vacunas tradicionales

Tesis para obtener el grado de Doctor en área de Química Biológica, de la Universidad de Buenos Aires, en 2018

El Virus de la enfermedad infecciosa de la bursa (IBDV) es el agente etiológico responsable de una enfermedad aguda contagiosa e inmunosupresora que afecta pollos jóvenes y causa importantes pérdidas económicas. La vacunación con virus inactivados o vivo-atenuados constituye el principal método de prevención y control de IBDV. Sin embargo, estas vacunas presentan desventajas debido a su naturaleza viral. En consecuencia, existe la necesidad de reemplazar dichas vacunas por nuevas herramientas sanitarias que tengan alta eficiencia con menores efectos colaterales. VP2, la proteína de cápside del virus, es el principal inductor de inmunidad protectora por lo que es el candidato apropiado para el desarrollo de vacunas a subunidad. En el presente trabajo se desarrolló una vacuna recombinante para IBDV basada en la expresión transitoria de VP2 en Nicotiana benthamiana. Se caracterizó el antígeno y se evaluó la inmunogenicidad y capacidad protectora del mismo tras la inoculación por distintas vías tanto en pollos libres de patógenos específicos como en aves de producción. Los resultados demostraron que el inmunógeno recombinante fue efectivo en generar una respuesta inmune protectora por vía parenteral pero no por vía de mucosas a menos que la inoculación oral haya seguido a una primera inoculación intramuscular. A su vez, el inmunógeno logró incrementar los niveles de anticuerpos específicos en gallinas reproductoras que fueron transmitidos a la progenie. Estos resultados evidencian un potencial uso del inmunógeno producido en planta como una alternativa a las vacunas convencionales para la enfermedad infecciosa de la bursa.

Infectious bursal disease virus (IBDV) is the etiological agent of an immunosuppressive and highly contagious disease that affects young birds causing important economic losses in the poultry industry. Currently, vaccination with inactivated and live-attenuated vaccines induces immunity in the flock against virulent viruses. However, conventional vaccines have a number of disadvantages because of their viral nature. Thus, there is a need to replace them by new ones with higher efficacy and fewer side-effects. The capsid protein VP2, which contains the major neutralizing epitopes, has been used for the development of subunit vaccines. In the present work a recombinant vaccine for IBDV based on the transient expression of VP2 in Nicotiana benthamiana was developed. The antigen was characterized and its immunogenicity and protective capacity after inoculation through different routes was evaluated in specific pathogen free chickens and in breeder hens. The results obtained showed that the recombinant immunogen was effective in generating an immune protective response through the parenteral but not mucosal routes unless oral inoculation followed an intramuscular prime. Moreover, the immunogen increased specific antibody levels in breeder hens which were transmitted to the offspring. These results evidence a potential use of the plant-based vaccine as an alternative to conventional vaccines against the infectious bursal disease.

Instituto de Biotecnología

Fil: Lucero, Maria Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina