Validation of a methodology for the caffeine quantification by liquid chromatography (UHPLC/DAD) | Validación de una metodología de cuantificación de cafeína por cromatografía líquida (UHPLC/DAD) | Validação de uma metodologia para a quantificação da cafeína por cromatografia líquida (UHPLC/DAD).

إنجليزي. The determination of caffeine in eight coffee samples from different cities of the Peruvian Amazon, Colombia, and Ecuador was carried out developing a methodology for the routine analysis of caffeine content in different samples by reversed-phase high-performance liquid chromatography. This study used a mobile phase of water: methanol (75:25, v/v), at a flow rate of 0.3 mL min-1 and a temperature of 45 °C. Caffeine was isocratically separated at 3.8 min. The caffeine concentrations in the samples were determined by a calibration curve with external standards, which were found to be in the range of 9.74 to 11.12 mg g-1 in roasted ground coffee, at 11.08 mg/g in coffee husk and from 9.17 to 26.59 mg/g in freeze-dried soluble coffee. 68.34, 93.98, and 78.0 % were recovered for the 50, 100, and 150 μg mL-1 fortifications, respectively. These results indicate that the quantification methodology was validated through a simple and rapid separation method. The study made it possible to obtain caffeine concentrations in coffee samples from the region and to suggest average consumption without exceeding healthy limits.

الأسبانية؛ قشتالية. Se realizó la determinación de cafeína en ocho muestras de café procedentes de diferentes ciudades de la Amazonía Peruana, Colombia y Ecuador, con el objetivo de desarrollar una metodología para el análisis de rutina del contenido de cafeína en diversas muestras por cromatografía líquida de alta eficiencia de fase reversa. Este estudio se realizó usando una fase móvil de agua: metanol (75:25, v/v), a un flujo de 0,3 mL min-1 y una temperatura de 45 °C. La cafeína fue isocráticamente separada a 3,8 min. Las concentraciones de cafeína en las muestras se determinaron mediante una curva de calibración con estándar externo, las cuales se encontraron en el rango de 9,74 a 11,12 mg g-1 en café tostado molido, en 11,08 mg/g en cáscara de café y de 9,17 a 26,59 mg/g en café soluble liofilizado. Se obtuvieron recuperaciones de 68,34, 93,98 y 78,0 % para las fortificaciones de 50, 100 y 150 μg mL-1, respectivamente. Estos resultados indican que la metodología de cuantificación fue validada a través de un método de separación sencilla y rápida. El estudio permitió obtener concentraciones de cafeína en muestras de café de la región y sugerir el consumo promedio sin superar los límites saludables.

البرتغالية. A determinação da cafeína em oito amostras de café provenientes de diferentes cidades da Amazónia peruana, da Colômbia e do Equador foi realizada com o objetivo de desenvolver uma metodologia para a análise de rotina do teor de cafeína em várias amostras por cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa. Este estudo foi efectuado utilizando uma fase móvel de água: metanol (75:25, v/v), a um caudal de 0,3 mL min-1 e a uma temperatura de 45 °C. A cafeína foi separada isocraticamente em 3,8 min. As concentrações de cafeína nas amostras foram determinadas por uma curva de calibração com padrão externo, que variou de 9,74 a 11,12 mg g-1 no café torrado moído, 11,08 mg/g na casca de café e 9,17 a 26,59 mg/g no café solúvel liofilizado. Recuperações de 68,34, 93,98 e 78,0 % foram obtidas para as fortificações de 50, 100 e 150 μg mL-1, respetivamente. Estes resultados indicam que a metodologia de quantificação foi validada através de um método de separação simples e rápido. O estudo possibilitou obter as concentrações de cafeína em amostras de café da região e sugerir um consumo médio sem ultrapassar os limites saudáveis.