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Morphology and chromatin condensation evaluation in fowl spermatozoa (Gallus gallus, Linnaeus, 1758) through the transmission electron microscopy | Avaliação da morfologia e da compactação cromatínica em espermatozóides de galo (Gallus gallus, Linnaeus, 1758) através de microscopia eletrônica de transmissão
2006
Jaqueline Melo Soares | Marcelo Emílio Beletti
The spermiogram is one of the principal methods of evaluation of the fertility in mammals; however some semen modifications as the spermatozoa chromatin condensation, are not identified in this routine, and can expressively interfere in the fertility of reproducers. In poultry breeding, generally the evaluation of reproducers is made by sampling and the evaluated parameters are in fewer quantities than in mammals, considering the spermatozoa chromatin condensation of the fowl has never been exploited. The objective of this work is verifying through the transmission electron microscopy, whether there are different intensities of spermatozoa chromatin condensation of fowl. So that, have been collected 20 samples of fowl semen, which were placed in 4% glutaraldehyde buffered in 0.1M sodium cacodilate to pH 7.2 for 48 hours, after being centrifugated and rinsed in cacodilate tampon, the semen was post-fixed in 1% osmium tetroxide plus 1.25% potassium ferrocyanide. The sediment was embedded, cut and contrasted. The thin sections were examined and documented in transmission electronic microscopy Zeiss EM-109. Generally the fowl spermatozoon has acrosome with homogenic or slightly granular and of moderate density material, the nucleus with dense or slightly granular chromatin, varies the gray scales, that is, the grades of condensation. It was also observed the "perforatorium", structure that links the nucleus to the acrosome. The insertion of the tail is made through two cetriules, being one transversal and the other longitudinal to the axle. The intermediate piece has typical axoneme involved by mitochondrias, apparently displayed longitudinally. The transition between the principal and the intermediate pieces of the tail is marked by the absence of the mitochondrias. The principal piece is formed by axoneme involved by a granular cytoplasm layer. In the evaluation of the morphological pathologies, it was observed rounded heads, folded, involved by the intermediate container of the piece, in a hook and all of them showing different grades of condensation. | O espermograma é um dos principais métodos de avaliação da fertilidade em mamíferos, contudo, algumas alterações do sêmen como a compactação da cromatina dos espermatozóides, não são identificadas nessa rotina, podendo interferir significativamente na fertilidade de reprodutores. Na avicultura, geralmente a avaliação de reprodutores é feita por amostragem e os parâmetros avaliados são em menor número que em mamíferos, sendo que a compactação da cromatina dos espermatozóides de galo nunca foi explorada. Este trabalho teve como objetivo verificar através da microscopia eletrônica de transmissão, se existe diferentes intensidades de compactação de cromatina em espermatozóides de galo. Para isto, foram coletadas 20 amostras de sêmen de galo, que foram fixadas por 48 horas em glutaraldeído 4% tamponado em cacodilato de sódio 0,1M a pH 7,2, após centrifugado e lavado em tampão cacodilato o sêmen foi pós-fixados em tetróxido de ósmio a 1% mais ferrocianeto de potássio a 1,25%. O sedimento foi incluído, cortado e posteriormente contrastado. Os cortes foram examinados e documentados em microscópio eletrônico Zeiss EM-109. Geralmente, os espermatozóides de galo possuem acrossoma com material homogêneo ou levemente granular e de densidade moderada, o núcleo com cromatina densa e levemente granular, varia as tonalidades de cinza, ou seja, os graus de compactação. Observou-se também o "perforatorium", estrutura que une o núcleo ao acrossoma. A inserção da cauda é por meio de dois centríolos, sendo um transversal e o outro longitudinal ao eixo. A peça intermediária possui axonema típico envolto por mitocôndrias aparentemente dispostas longitudinalmente. A transição entre as peças intermediária e principal da cauda é marcada pela ausência das mitocôndrias. A peça principal é formada pelo axonema envolto por uma camada de citoplasma granular. Na avaliação das patologias morfológicas observaram-se cabeças arredondadas, dobradas, envoltas por conteúdo da peça intermediária, em anzol e todas apresentando diferentes graus de compactação.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Residual levels on medroxyprogesterone acetate (MAP) impregnated sponges after estrus synchronization treatment in cyclic ewes | Níveis residuais em esponjas impregnadas com acetato de medroxiprogesterona (MAP) após o tratamento de sincronização do estro nas ovelhas em período reprodutivo
1999
Laura Simonetti | Juan Carlos Gardón | Guillermo Ramos
A pool of polyurethane sponges impregnated with medroxyprogesterone acetate (MAP) was prepared. Real level of progestagen on sponges was checked prior to sponge treatment insertion. During spring a total of 126 cyclic Merino ewes were intravaginally treated with MAP-impregnated pessaries for the synchronization of estrus. After 14 days treatment, sponges were removed. Estrus detection was performed with vasectomized rams. Ewes were inspected for the presence of marks twice a day. Ewes in estrus were artificially inseminated with fresh diluted semen containing a dose of 300x10(6) total sperm. Artificial insemination was performed 12 hours after estrus presentation. Residual levels of MAP (RMAP) on removed sponges were measured by spectrophotometry at 241 nM and examined in relation to their estrus response and fertility. Real dose of MAP was in average 54 mg. RMAP found on sponges following treatment were in average 25.00 ± 0.84 mg. Percentage of estrus synchronization was 92.86% and pregnancy rate was 50.43%. There were no significant differences for RMAP between ewes with (24.70 ± 0.86 mg) and without (28.89 ± 3.65 mg) estrus response (p>;0.10). There were also no significant differences for RMAP between pregnant (25.56 ± 1.25 mg) and non-pregnant (23.83 ± 1.18 mg) ewes (p>;0.10). It was concluded that the 60 mg MAP dose conventionally used for estrus synchronization in ewes is higher than the amount uptaken by the females. | Preparou-se um conjunto de esponjas de poliuretano impregnadas com acetato de medroxiprogesterona (MAP). O nível real do progestágeno nas esponjas foi checado com anterioridade à inserção das esponjas do tratamento. Um total de 126 ovelhas Merino em período reprodutivo (primavera) foram tratadas com esponjas intravaginais impregnadas com MAP para sincronização do estro. As esponjas foram retiradas após 14 dias de tratamento. Utilizaram-se carneiros vasectomizados para detecção do cio. As ovelhas foram observadas para a presença das marcas duas vezes ao dia. As ovelhas que apresentaram cio foram inseminadas artificialmente com sêmen fresco diluído, empregando-se uma dose de 300x10(6) espermatozóides totais. A inseminação artificial foi praticada 12 horas depois da apresentação do cio. Os níveis residuais de MAP (RMAP) nas esponjas retiradas foram medidos por espectrofotometria a 241 nM e examinados em relação à resposta estral e à fertilidade. A dose real de MAP foi como média 54 mg. RMAP encontrados em esponjas após o tratamento foram como média 25,00 ± 0,84 mg. A porcentagem de sincronização dos cios foi 92,86% e a taxa de prenhez, 50,43%. Não foram encontradas diferenças significativas entre RMAP das ovelhas com (24,70 ± 0,86 mg) e sem (28,89 ± 3,65 mg) resposta estral (p>;0,10). Também não foram encontradas diferenças significativas entre RMAP das ovelhas prenhes (25,56 ± 1,25 mg) e não-prenhes (23,83 ± 1,18 mg) (p>;0,10). Conclui-se que a dose de 60 mg MAP utilizada convencionalmente para sincronização do estro em ovelhas é superior à quantidade utilizada pelas fêmeas.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Efeito de pré-infusões uterinas sobre a fertilidade de Marrãs (Sus scrofa domestica, Linnaeus, 1758) | The effect of intrauterine sensitilization on gilt (Sus scrofa domestica, Linnaeus, 1758) fertility
1999
Fernando Pandolfo Bortolozzo | Ivo Wentz | Isabel Scheid | Antonio Lourenço Guidoni
O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da pré-sensibilização uterina com antígenos espermáticos ou seminais sobre a fertilidade da marrã de reposição. Cento e quarenta e uma marrãs cruzadas pré-púberes com 160-165 dias de idade foram alojadas. O estro foi induzido pela aplicação de PMSG-hCG no alojamento. A detecção de estro foi realizada duas vezes ao dia com o auxílio do macho. As pré-infusões uterinas foram realizadas 24 horas após o início do estro no primeiro e segundo estro. As marrãs foram agrupadas em 5 diferentes tratamentos: espermatozóides mortos (EM, n = 29), plasma seminal (PS, n = 29), plasma seminal e espermatozóides mortos (PS + EM, n = 28), solução salina fisiológica (SS, n = 28) e controle (n = 27). Marrãs que sempre apresentaram reflexo de tolerância ao macho (RTM) positivo no momento da infusão foram analisadas separadamente (Grupo 1) daquelas que tiveram no mínimo uma vez um RTM negativo no momento da infusão (Grupo 2). Somente uma inseminação artificial (IA) foi realizada 24 horas após a manifestação do RTM no terceiro cio. Aos 28-32 dias após a IA, as marrãs foram abatidas e os fetos e corpos lúteos foram contados. No Grupo 1, a taxa de prenhez do grupo PS (100%) foi superior (p<0,05) ao controle (90%), PS + EM (90,9%) e SS (80%), entretanto foi similar à do EM (92,9%). No grupo 2, não ocorreram diferenças entre os grupos (p<0,05). Não houve diferenças entre os tratamentos com relação à taxa ovulatória, taxa de perda embrionária e número de embriões viáveis. Os resultados sugerem que melhora significativa causada pela pré-sensibilização uterina possa ser observada somente se, por alguma outra razão, os índices reprodutivos do rebanho deixassem a desejar. | The objective of this study was to investigate the effect of uterine presensitization with sperm or seminal antigens on replacement gilt fertility. One hundred and forty one hybrid-gilts at the age of 160-165 days were housed. Oestrus was induced with PMSG and hCG injection at housing. Oestrus detection was done twice daily using a boar. Intrauterine preinfusions were performed 24 hours after the onset of oestrus at the first and second oestrus. Groups of gilts were subjected to 5 different treatments: dead sperm (DS, n = 29), seminal plasma (SP, n = 29), seminal plasma and dead sperm (SP + DS, n = 28), physiological saline solution (SS, n = 28) and control (n = 27). Gilts which always had a positive backpressure test (BPT) at infusion time were analysed separately (Group 1) from those which had at least one negative BPT at infusion time (Group 2). Only one artificial insemination (AI) was performed 24 hours after the onset of the BPT at the third oestrus. Twenty-eight to thirty-two days after AI the gilts were slaughtered, fetuses and corpora lutea counted. In the group 1 the pregnancy rates by SP gilts (100%) was significantly (p<0.05) superior than the control (90%), SP + DS (90.9%) and SS (80%), however was similar to DS (92.9%) infused gilts. In the group 2 there were no differences (p<0.05) among groups. There was no difference among treatments with regard to the ovulation rates, number of normal embryos and embryonic loss rates. These results suggest that any significant improvement caused by uterin presensitization might only be observed when overall herd reproductive indexes are low.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Alterações reprodutivas em ratos machos expostos perinatalmente aos frutos da Solanum lycocarpum | Reproductive alterations in male rats exposed perinatally to Solanum lycocarpum fruits
2009
Aline Schwarz | Wilma De Grava Kempinas | Milena Rodrigues Soares | Maria Martha Bernardi | Helenice de Souza Spinosa
Ratas prenhes foram tratadas do dia 06 da gestação (GD 06) ao dia 07 pós-natal (PND 07) com frutos verdes secos e moídos da Solanum lycocarpum (10% na ração). Após nascimento das ninhadas, foi avaliado na prole masculina adulta aos 60 e 90 dias de vida, o número de espermátides e a produção espermática diária nos testículos e o tempo de trânsito espermático no epidídimo. A exposição não foi capaz de promover alterações na produção espermática diária (DSP) e no número de espermátides produzidas pelo testículo dos ratos expostos aos frutos verdes da S. lycocarpum durante a gestação e início da lactação. Não foram observadas alterações no tempo de trânsito espermático na cabeça do epidídimo, porém, foi constatado menor número de espermatozóides no corpo/cauda do epidídimo nos machos experimentais com 90 dias de vida, provavelmente resultante do menor tempo de trânsito espermático observado no corpo/cauda do epidídimo aos PND 90. Estes dados sugerem que a exposição de ratos aos frutos verdes da S. lycocarpum durante a gestação e início da lactação, não foi suficiente para promover alterações na produção mas sim no trânsito espermático, indicando possível alteração no eixo hormônio liberador das gonadotrofinas hipotálamo-hipófise-gônada | This work employed pregnant rats treated with Solanum lycocarpum unripe fruits (10% in diet) from gestation day (GD) 06 to post-natal day (PND) 07, for the evaluation of the sperm number, daily sperm production and epididymal sperm transit time of the male offspring at PND 60 and PND 90. No differences were observed in the daily sperm production (DSP) and sperm number in the testis of the exposed males at PND 60 and PND 90. Also, no alterations were observed in sperm transit time in the caput epididymis of the exposed males at PND 60 and PND 90. However, a reduced sperm transit time was observed in the corpus/cauda epididymis of the experimental males at PND 90. The last data may explain the reduced sperm number observed in the corpus/cauda epididymis of the experimental male rats at PND 90. These data show that the male rats exposed to S. lycocarpum fruits during gestation did not present alterations in testis sperm production and number, however the sperm transit time through epididymis was impaired, resulting in a decreased number of spermatozoa in epididymis cauda. We conclude that S. lycocarpum may cause imbalance on hypothalamus-pituitary gland axis
اظهر المزيد [+] اقل [-]Evaluation of frozen bull semen. Quick and slow thermoresistance tests: effects on fertility | Avaliação de sêmen congelado de bovinos. Provas lenta e rápida de termo-resistência: efeitos sobre a fertilidade
1992
Rubens Paes de Arruda | Valquíria Hyppolito Barnabe | Mauricio Mello de Alencar | Renato Campanarut Barnabe
<p>It was studied the effect of frozen bull semen after thawing and incubation at 45 °C during one hour or at 38 °C during 5 hours (Quick and Slow Thermoresistance Tests), on fertility of beef cows. Treatment 1 included 6 groups of 10 females inseminated with semen showing 20% or plus of progressive motility on quick test and less than 20% on slow test. Treatment 2 (control) included 5 groups of 10 and 1 group of 9 females inseminated with semen showing 20% of progressive motility on slow test and any value on quick test. Only one straw was utilized per estrus, admitted up to 3 repetitions. Pregnancy diagnosis was made by rectal palpation, 60 days after A.I.. Satisfactory results in pregnancy rates were obtained in both treatments (QTT/Q = 0.793 + ou - 0.05 and STT/S = 0.875 + ou - 0.05) with no statistical differences (P>0.05) between them. There was no statistical differences in pregnancy rates of cows inseminated with semen showing motility from 20 to 50% after incubation at 45 °C for one hour.</p> | <p>0 objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficiência de sêmen congelado, submetido às provas rápida (45 °C/1 hora) e lenta (38 °C/5 horas) de termoresistência, sobre a fertilidade de fêmeas da espécie bovina. Cento e dezenove vacas foram selecionadas e divididas em 2 tratamentos. No tratamento 1 foram incluídos 6 grupos de 10 fêmeas, inseminadas com material cuja análise laboratorial revelou motilidade espermática progressiva superior ou igual a 20%, na prova rápida e valor menor a 20% na prova lenta. O tratamento 2 (controle) utilizou 59 vacas distribuídas em 5 grupos de 10 e un grupo de 9, inseminadas com material que, na prova lenta, apresentou 20% de motilidade espermática progressiva e qualquer valor na prova rápida. Apenas uma palheta foi utilizada por estro, tolerando-se até 3 repetições de cio. 0 diagnóstico de gestação foi realizado por palpação retal, cerca de 60 dias após a última inseminação artificial. Resultados satisfatórios foram alcançados nas taxas de prenhez (TTR/R = 0,793 + ou - 0,05 e TTR/L = 0,875 + ou - 0,05), não havendo diferença estatística (P>0,05) quanto ao tipo de provas do termo-resistência. Não houve diferença significativa (P>0,05) de prenhez de fêmeas insentinadas com material sibmetido ao teste de termo-resistência rápido, quando a motilidade espermática variou de 20 a 50%.</p>
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