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Proteômica para investigar a congelabilidade do semen bovino | Proteomics to investigate bull’s semen freezability
2013
Marcelo Roncoletta | Erika da Silva Carvalho Morani | Lúcia Helena Rodrigues | Paulo Henrique Francheschini
O objetivo do presente estudo foi avaliar se a composição proteica de plasma seminal, verificada por eletroforese bidimensional (2DE), pode interferir na congelabilidade do sêmen de touros, e se existe a possibilidade de predizer tal característica em touros doadores de sêmen. Amostras de 20 touros (diferentes raças) com mínimo de três anos de histórico de produção em Central de Coleta de sêmen foram coletadas. Todos os touros tinham de 2 a 7 anos de idade. A congelabilidade do sêmen foi calculada por no de ejaculados aprovados pós-descongelação / no de ejaculados submetidos à congelação (depois do crivo do padrão de qualidade da empresa para aprovar o ejaculado para ser submetido a congelação). Os touros foram divididos em três grupos: ALTA (=>80% aproveitamento de ejaculados encaminhados à congelação); MÉDIA (>60 a 79% ejaculados aprovados) e BAIXA (=<59% ejaculados aprovados). Sessenta e oito corridas de géis 2DE foram avaliadas nas amostras de plasma seminal, que detectaram 225 spots com quantidade de proteína diferente entre as mesmas (VION). Pela estatística utilizada, comparando-se a congelabilidade do sêmen com quantidade de proteína detectada de cada spot (VION), constatou-se que 2 spots apresentaram-se com quantidade significativa de proteína diferente entre os dois grupos de congelabilidade do sêmen, considerando spots que foram detectados em mais de 75% das amostras corridas. Os touros taurinos apresentaram perfil proteico mais homogêneo quando comparado com os zebuínos, considerando número e frequência de spots. Tais resultados demonstram um potencial para uso da proteômica como ferramenta preditiva da congelabilidade do sêmen de touros, porém com necessidade de maiores estudos, principalmente para melhor compreensão de interações proteicas entre membrana espermática, plasma seminal e diluidores de sêmen utilizados, já que podem interferir no fenótipo proteico avaliado e na congelabilidade do sêmen, seja de forma positiva ou negativa. | The present study was undertaken the protein composition in 2D-electrophoretic pattern (2DE) of the seminal plasma (SP) can interfere in the semen bull freezability, and if we can use that for predicting semen bull freezability. Samples were obtained of 20 bulls (different breeds) with a minimum of 3 years history semen production in commercial semen collection Center. All animals ranged between 2 - 7 years of age. The semen freezability was calculated by # of thawed and approved ejaculates / # of ejaculates submitted to cryopreservation (after semen evaluation and approved to submitted to freeze). The bulls were divided in 3 groups: HIGH (=>80% ejaculates approved); MEDIUM (>60% and <79% ejaculates approved); LOW (=<59% ejaculates approved); the pattern and criteria were the same used in the routine of the commercial semen Center. 68 gels were carried through by 2DE of SP samples indicated 225 detected spots with protein different amount (VION) comparing. Comparing bull´s semen freezability and VION of each spot found difference among 2 spots from High and Low, even considering just spots with % of detection frequency bigger than 75%. The taurine bulls demonstrated more homogeneous profile when comparing with zebu bulls, considering number and frequency of appearance of spots. The results showed that proteomics can be a useful tool to predict the semen freezability, but we´ll need to study better the interactions between sperm membrane, seminal plasma and extender to comprehend better which proteome phenotype interfere positive or negatively in the semen freezability.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Immunogenicity evaluation of proteins from a Mycobacterium bovis isolated from cattle in the State of Goiás, Brasil | Determinação da imunogenicidade de proteínas de amostra de Mycobacterium bovis isolada de bovinos no estado de Goiás, Brasil
2013
Cinthya Marques Fortes | Bruno Souza Marques | Viviane Cambuí Mesquita Rocha | Ana Paula Junqueira-Kipnis
<p>Bovine tuberculosis, persists in several countries as a threat to health of the herds despite the efforts given to the control and eradication of the disease. In order to detect immunogenic proteins with a potential to be used in a bovine tuberculosis diagnosis test, serum samples obtained from reactors and no reactors to intradermal tuberculin test, were evaluated for reactivity to <em>Mycobacterium bovis </em>antigens from a bacilli originated in Goiás – Brazil. The proteins immunogenicity from <em>M. bovis </em>was obtained by Western blot according to the molecular weight profile. The majority of the PPD positive bovine (67.92%) recognized a protein with 26kDa, suggesting the use of this protein in a serological test for bovine tuberculosis.</p> | <p>A tuberculose bovina persiste em vários países como ameaça à saúde dos rebanhos apesar dos esforços dispensados ao controle e erradicação da doença. O objetivo deste trabalho foi elucidar quais seriam as proteínas mais imunogênicas e, portanto, com potencial de serem utilizadas em novos testes de diagnóstico bovino da tuberculose. Amostras de soro obtidas de animais reatores e não reatores ao teste de tuberculinização intradérmica foram avaliados quanto ao reconhecimento de antígenos proteicos de <em>Mycobacterium bovis</em>, isolado de bovino no Estado de Goiás. A imunogenicidade das proteínas de <em>M. bovis </em>foi obtida por meio da técnica de Western blot. A maioria dos bovinos PPD positivos (67,92%) reconheceu o antígeno de 26kDa, sugerindo o seu uso potencial no desenvolvimento de um ensaio sorológico para a tuberculose bovina.</p>
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