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Investigation of bovine viral diarrhea virus in young bovines | Pesquisa do vírus da diarréia viral bovina em bovinos jovens
2003
Rejane Peixoto Noronha | Gubio Soares Campos | Silvia Ines Sardi
In this research we analyzed the presence of Bovine viral diarrhea virus in young bovines. We performed a serological study and viral isolament in 220 bovines from different counties. The serum-neutralization assay detected 123 (56%) positive bovines to BVDV and showed that 82% of the samples had SNT up to 512 and 18 %, more than 512. It was collected the buffy coats from these bovines to performed the viral isolament in culture cells and the presence of the virus was confirmed in four healthy bovines and one calves with respiratory symptoms. The five viral isolaments are non-citophatic strains. | Nesta pesquisa analisamos a presença do vírus da Diarréia viral bovina em bovinos jovens através de um estudo sorológico e isolamento viral. A técnica de seroneutralização detectou de um total de 220 bovinos, 123 (56%) animais sorologicamente positivos. A distribuição dos títulos de anticorpos soroneutralizantes(TSN), mostrou que 82% das amostras apresentaram TSN de até 512, enquanto que 18% apresentaram TSN maiores que 512. O isolamento viral a partir da fração leucocitaria desses bovinos, confirmou a presença do vírus em quatro bovinos aparentemente saudáveis e de um bezerro com sintomatologia respiratória. Os cinco isolados virais não apresentaram efeito citopático nos cultivos celulares.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Development of a polymerase chain reaction and its comparison with agar gel immunodiffusion test in the detection of bovine leukemia virus infection | Desenvolvimento de uma reação em cadeia pela polimerase e comparação com a imunodifusão em gel de agar na detecção de infecções pelo vírus da leucemia bovina
2003
Marcelo Fernandes Camargos | Daniel Stancek | Leandro Moreira Lessa | Jenner Karlisson Pimenta Reis | Maurílio Andrade Rocha | Rômulo Cerqueira Leite
Polymerase chain reaction (PCR) was used for bovine leukemia virus (BLV) detection in the peripheral leukocytes of the infected bovines. The primers used were designed to amplify a part of env gene of BLV. PCR products were analyzed by agarose gel electrophoresis stained by ethidium bromide. The analytical specificity of PCR was confirmed by enzymatic restriction analysis of the PCR product with Bam HI and also by nucleotide sequence analysis of three PCR samples. Sixty five animals were tested for anti-BLV antibody, by agar gel-immunodiffusion test (AGID) and for direct BLV detection by PCR. There was a 73.80% concordance rate between the two tests. Four animals positive in AGID were PCR negative, while 13 AGID negative animals were found PCR positive. PCR got a 0.87 diagnosis sensitivity and 0.62 specificity. The developed PCR may be complementary tool in the diagnosis of BLV infection, but should have it diagnosis sensitivity improved. | A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para a detecção do vírus da leucemia bovina (VLB) em leucócitos periféricos de bovinos infectados. Os iniciadores utilizados foram construídos para amplificar uma parte do gene env do VLB. Os produtos da PCR foram analisados por eletroforese em gel de agarose corados por brometo de etídeo. A especificidade analítica da PCR foi confirmada por restrição enzimática dos produtos da reação com Bam HI e também pela análise da seqüência de três amostras. Sessenta e cinco animais foram testados para a presença de anticorpos anti-VLB, pela imunodifusão em gel de agar (IDGA) e pela PCR, para detecção direta do VLB. Houve 73,80% de concordância entre os dois testes. Quatro animais positivos na IDGA foram PCR negativos, enquanto 13 animais negativos na IDGA foram positivos na PCR. A sensibilidade diagnóstica obtida foi de 0,87 e a especificidade diagnóstica 0,62. A PCR desenvolvida pode ser uma ferramenta complementar no diagnóstico de infecções causadas pelo VLB, mas deve ter sua sensibilidade diagnóstica melhorada.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Irrigation of the cloacal bursa in Gallus gallus domesticus (Breeding stoch of hubbard lineage) | Irrigação da bolsa cloacal em Gallus gallus domesticus (Matrizes de corte Hubbard)
2003
Marcelo Ismar Silva Santana | Frederico Ozanam Carneiro e Silva | Renato Souto Severino | Pedro Primo Bombonato | Amilton Vallandro Marçal
The Cloacal Bursa's arteries of 30 females Hubbard were injected with 50% Neoprene Latex 450 solution, and submited to dissection. The ages of the birds was to 10 to 12 weeks. The vessel's origin, number and sequence were studied The results showed the participation of the left and right internal pudendal artery in all cases, witch the association of the cranial mesenteric artery (333,33%), to median caudal artery (3,33%), and to left internal iliac artery (3,33%). The total branches number, without considering its origin, varied in 2 to 9, being 4 branches the major frequency. The vessels distribuition was the same in each bird. | Estudou-se em 30 galinhas da linhagem Hubbard, com idade variando de 10 a 12 semanas a origem, o número e a ordenação dos vasos arteriais da Bolsa Cloacal mediante injeção do sistema vascular com solução aquosa a 50% de Neoprene Látex 450 e posterior dissecação. Os resultados mostraram a participação das artérias pudenternas esquerda e direita em todos os casos, às quais associavam-se as artérias mesentérica caudal (33,33%), caudal mediana (3,33%) e iliaca interna esquerda (3,33%). O número total de ramos, independentemente da sua origem, variou de 2 a 9com maior freqüência de 4 ramos. A distribuição dos vasos se fez de maneira própria para cada peça.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Evaluation of two methods for early pregnancy diagnosis in ewes: transrectal ultrasonography and pregnancy detector for small ruminant (DPPR-80®) | Avaliação de dois métodos de diagnóstico precoce de gestação em ovelhas: ultra-sonografia transretal e detector de prenhez para pequenos ruminantes (DPPR-80®)
2003
Claudia Veronica Calamari | Sílvia Ferrari | Frederico Fontoura Leinz | Carlos Frederico de Carvalho Rodrigues | Diorandi Bianchini | Fernando Ferreira | Ricardo Augusto Dias
Ultrasonography was perfomed in 88 ewes from Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia, São Paulo state, from march to may , 2001. Animals were examined from 19º to 33º days of pregnancy by transrectal ultrasonography in alternate days examinations, and by pregnancy detector for small ruminants (DPPR-80Ò) from 25º to 45º day. Positive diagnostic by transretal ultrasonography was obtained after yolk sac visualization. The embryo heartbeat was observed after 25 day of pregnancy. The positive diagnostic was obtained by pregnancy detector when embrionic heart was 160 to 200 beats/minute. Births confirmed the examinations. Three abortions ocurred during the experiment and these females were excluded from the group. From 85 ewes examined, 64 lambed. The transrectal ultrasonography accuracy in 19º day of pregnancy was 35,29%, with higher rate (82,53%) in 31º day. The doppler accuracy in 25º day was 24,71% and 34,12.00% in 45º day. Embryo heartbeat was detected by transrectal ultrasonography after 21 days of pregnancy and the first placentoms were observed after 25 days of pregnancy. In conclusion, transrectal ultrasonography was better than doppler in early pregnancy diagnosis in sheep. | No período de março a maio de 2001, foram realizados os exames ultra-sonográficos em 88 ovelhas do Núcleo de Pesquisas Zootécnicas Sudoeste - Instituto de Zootecnia. Os animais foram examinados entre o 19º e 33º dia de gestação pela ultra-sonografia transretal com exames executados em dias alternados, e do 25º ao 45º dia pelo detector de prenhez para pequenos ruminantes (DPPR-80Ò). O diagnóstico foi considerado positivo pela ultra-sonografia transretal por meio da visualização do saco gestacional e embrião. Após o 25º dia de gestação foi observado também o batimento cardíaco embrionário, cuja freqüência é de 160 a 200 batimentos por minuto. Esta observação foi dada como diagnóstico de gestação. Os nascimentos confirmaram os resultados dos exames. Dentre 88 fêmeas acasaladas, 3 abortaram durante o experimento e foram retiradas do grupo. Das 85 fêmeas restantes, 64 pariram. O diagnóstico de prenhez por meio da ultra-sonografia transretal apresentou 35,29% de acurácia no 19º dia de gestação, culminando em 82,35.00% no 31º dia de gestação. Pelo detector de prenhez, a acurácia foi de 24,71% no 25º dia de gestação e 34,12.00% no 45º dia. Foi possível visualizar os batimentos cardíacos do embrião pela ultra-sonografia transretal à partir do 21º dia de gestação e os primeiros placentomas foram observados ao redor do 25º dia de gestação. A ultra-sonografia transretal mostrou-se um método superior ao detector de prenhez para pequenos ruminantes, para diagnóstico precoce de gestação em ovelhas.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Pesquisa sorológica de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em animais de produção do Estado de São Paulo, Brasil | Serological survey of antibodies to Toxoplasma gondii in food animals from São Paulo state, Brazil
2003
Luciana Regina Meireles | Andrés Jimenez Galisteo Jr. | Heitor Franco de Andrade Jr.
A toxoplasmose é uma das infecções parasitárias mais prevalentes no homem e no rebanho, e a sua transmissão tem sido usualmente atribuída à ingestão de carnes cruas ou mal cozidas, de animais de produção infectados, sendo que a taxa de infecção destes animais pode ser um importante índice preditivo da doença humana, de alta prevalência no Brasil e no estado de São Paulo. Estudando este aspecto de Saúde Pública, nós testamos amostras séricas de bovinos, caprinos, ovinos e frangos de corte de matadouros do Estado de São Paulo, para a presença de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii por um ensaio imunoenzimático de fase sólida (ELISA). Nós encontramos anticorpos específicos em 31,00% (62/200) dos ovinos, 17,00% (34/200) dos caprinos e 11,00% (22/200) dos bovinos testados, sem positividade em 185 amostras de frangos de corte. Apesar de diferenças em hábitos alimentares de cada espécie, estas taxas de infecção foram menores em criações intensivas, relacionadas ao tipo de manejo da criação, o que pode reduzir a taxa de infecção por este parasita no rebanho. | Toxoplasmosis is one of the most prevalent parasitic infections of man and livestock, and its transmission has usually been attributed to ingestion of undercooked or raw meat from infected livestock, with the infection rate in those animals being an important risk predictor of human disease, high in Brazil and São Paulo State. Looking for this public health problem, we tested serum samples from cattle, goat, sheep and chicken from the State of São Paulo, Brazil, for IgG antibodies to Toxoplasma gondii by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Antibodies to Toxoplasma gondii were found in 31.00% (62/200) of sheep, 17.00% (34/200) of goat and 11.00% (22/200) of cattle, without positive sample in chicken. Despite differences in feeding habits of each species, the rate of infection of tested animals could be better attributed to livestock management methods, which improvement could reduce infection.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Atrativo para as abelhas Apis mellifera e polinização em café (Coffea arabica L.) | Attractives to africanized honey bees and pollination in coffee flowers (Coffea arabica L.)
2003
Darclet Teresinha Malerbo-Souza | Regina Helena Nogueira-Couto | Leoman Almeida Couto | Julio César de Souza
O presente experimento foi conduzido em Jaboticabal, SP, e teve como objetivos estudar uma cultura de café (Coffea arabica L., var. Mundo Novo), quanto à biologia floral, a freqüência e comportamento dos insetos na flor, testar o produto Bee-HereR (Hoescht Shering Agrevo do Brasil Ltda) quanto a sua atratividade para as abelhas Apis mellifera e verificar a produção de frutos com e sem a visita dos insetos. Para isso, foram verificados o tempo do desenvolvimento e quantidade de açúcar solúvel do néctar das flores; freqüência das visitações dos insetos, no decorrer do dia, por meio de contagem do número de insetos visitando as flores, a cada 60 minutos, das 8 às 17 horas, 10 minutos em cada horário; tempo (em segundos) e tipo de coleta (néctar e/ou pólen) dos insetos mais freqüentes; perda de botões florais; porcentagem de flores que se transformaram em frutos; tempo de formação e contagem dos grãos de café, observando-se a porcentagem de frutificação em flores visitadas ou não pelos insetos. Também foram realizados testes por pulverização utilizando-se o produto Bee-HereR , diluído em xarope e em água, em diferentes horários. A flor durou, em média, cerca de 3 dias desde sua abertura até o murchamento. A quantidade de açúcares do néctar apresentou diferença significativa entre os horários, sendo maior às 8 horas (em média, 102,18 ± 8,75 mg de carboidratos totais por flor). A abelha A. mellifera foi o inseto mais freqüente nas flores de café, coletando, principalmente, néctar no decorrer do dia. A perda de botões florais causada pelas chuvas foi, em média, 26,50 ± 11,70%. O tempo para a formação do fruto foi 6 meses e o número de frutos decorrentes do tratamento descoberto foi maior (38,79% e 168,38%, em 1993 e 1994, respectivamente) que do tratamento coberto. Apesar da eficiência do produto Bee-HereR ser afetada pelas condições climáticas, ele pode ser usado para atrair as abelhas A. mellifera na cultura. | The present experiment was carried out in Jaboticabal, SP, Brazil, to study the frequency and behaviour of insects with respect coffee (Coffea arabica L., var. Mundo Novo) flowers, the effect insects on fruit production, forage types of more frequent bees and the effectiveness of Bee-HereR (Hoescht Shering Agrevo do Brasil Ltda) attractant on honeybee visits. For that the time of development and the amount of soluble sugar of the nectar of the flowers were verified, frequency of the visitations of the insects in elapsing of the day by means of insects number visiting the flowers, to every 60 minutes, of 8:00 at the 17 hours, 10 minutes in every schedule; time (in seconds) and collection type (nectar and/or pollen) ; loss of floral buttons; percentage of flowers that they became fruits; time of formation and number of coffee grains, being observed the fruition percentage in visited flowers or not for the insects. Tests were also accomplished by spraying being used the product Bee-Here, diluted in syrup and in water in different schedules. The flower lasted on the average about 3 days from its opening to the withering. The amount of soluble sugar of the nectar presented significant difference among the schedules, being larger at the 8 hours (on the average, 102.18 ± 8,75 mg of glucose for flower). The most frequent insect to visit the coffee flowers was the africanized honey bees, collecting mainly nectar during the day. The number of fruits in the uncovered treatment was 38,79% and 168,38% higher in 1993 and 1994, respectively, than the covered ones. In spite of the efficiency of the product Bee-HereR to be affected by climatic conditions, it can be used to attract honeybees in coffee orchards.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Desenvolvimento embrionário in vitro de oócitos bovinos mantidos em líquido folicular ou TCM-hepes | In vitro embryo development from bovine oocytes maintained in follicular fluid or TCM-hepes
2003
Denis Faustino Alves | Lucio Pereira Rauber | Fernanda Bastos Rubin | Mari Lourdes Bernardi | Diogenes Dezen | Carlos Antônio Mondino Silva | Mara Iolanda Batistella Rubin
Complexos Cumulus-Oócito (CCO) bovinos foram divididos em 4 grupos para avaliar o seu comportamento durante a manutenção em LFb e maturação in vitro (MIV) em TCM-199 com ou sem Hepes. CCO MIV por 24h em TCM-199 em estufa a 39°C com 5,00% de CO2 (Controle) tiveram o seu desenvolvimento comparado ao de CCO MIV em tubos repletos de TCM-HEPES (5,95 mg/mL), em banho-maria (BM) a 39ºC por 24h (Grupo 1 - BM24h), ao de CCO mantidos em líquido folicular bovino (LFb), por 6h a 30ºC seguido de maturação por 18h nas mesmas condições que o grupo Controle (Grupo 2 - LFb6C18h) e ao de CCO mantidos em LFb seguido da maturação por 18h sob as mesmas condições que o grupo 1 (Grupo 3 - LFb6BM18h). A fecundação foi realizada em FERT-TALP por 18h. Os zigotos foram cultivados em SOFaaci, sob óleo mineral, em bolsas plásticas gaseificadas. A taxa de clivagem no Grupo Controle foi superior a do Grupo 3 (P<0,05), mas não houve diferença no percentual de blastocistos no D7 e D9 e no de blastocistos eclodidos entre os 4 grupos. Portanto, oócitos podem ser mantidos por 6h em LFb, a 30ºC, antes da maturação em TCM-HEPES por 18h ou ser maturados por 24h, em TCM-HEPES, em banho-maria a 39ºC, sem atmosfera gasosa controlada. A simplificação da MIV aqui introduzida através do preenchimento de tubos de 1,0mL com TCM-HEPES e manutenção em banho-maria a 39ºC, poderá ser uma opção viável e prática para os programas de OPU/PIV em bovinos. | In order to evaluate the effect of a transport medium on the rate of in vitro embryonic development, 1381 Cumulus-oocyte Complexes (COC) were obtained by aspiration of 2-8mm diameter follicles witch were randomly divided in 4 treatment groups. The Control group was formed by oocytes matured in modified TCM-199 for 24h, incubated at 39°C and 5,00% CO2 with saturated humidity. The group 1 (WB24h), included oocytes matured in 1.0mL tubes containing TCM-HEPES (5.95mg/mL), in water bath (WB) at 39°C for 24h. The group 2 (FFb6C18h), included oocytes kept in bovine follicular fluid (FFb) for 6h at 30°C followed by a period of 18h maturation under the same conditions as the Control group and with the oocytes maintained in FFb followed by 18h IVM under the same conditions as the group 1, group 3 (FFb6WB18h). Fertilization was performed in FERT-TALP for 18h. Zygotes were cultured in SOFaaci under mineral oil within gasified bags. The cleavage rate differed (P<0.05) between the Control and FFb6BM18h groups. However, there was no difference on the D7 and D9 blastocyst rates and on the percentage of blastocyst ecloded. It was concluded that it is possible to maintain the oocytes in FFb for 6h at 30°C before 18h IVM, or to proote the transport and maturation of the oocytes for 24h, in TCM-HEPES and water-bath at 39°C, without compromising embryonic development. The simplification of MIV showed in this experiment through of tubes (1.0mL) replete with TCM-HEPES and holding in water bath at 39°C, could be a viable and practice for the bovine programs of OPU/PIV.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Effects of calving number's on pelvimetrics traits in dans and external mesuraments calves in Nelore breed | Efeito do número de partos sobre características pelvimétricas em matrizes e medidas externas de bezerros da raça Nelore
2003
Priscila Carvalho de Oliveira | Pedro Primo Bombonato | Júlio César de Carvalho Balieiro
External and internal pelvic, body measurements and external measurements of calves were in vivo accomplished in 142 females of bovine Nelore breed, using standard scale and Rice pelvimeter. For comparison of the different measurements, the animals were divided in three groups, according to the occurrence and frequency of births (nuliparus, primiparus and multiparus). Significant differences (P<0,05), detect by analyses of variance, among the three groups they were observed for variables: ilioisquiatic, medium bi-iliac, sacro-pubic, internal bi-isquiatic, ellipse area, rectangle area, and thoracic perimeter of calves. The estimates of correlations among external and internal pelvic measurements, among external pelvic measurements with external measurements of calves and internal pelvic measurements and external measurements of calves were, in general, of low, indicating absence of associations among the different measures. | Mensurações pélvicas externas e internas e medidas externas de bezerros foram realizadas in vivo em 142 fêmeas de bovinos da raça Nelore, utilizando régua padrão e pelvímetro de Rice. Para efeito de comparação das diferentes mensurações, os animais foram divididos em três grupos, segundo a ocorrência e freqüência de partos (nulíparas, primíparas e pluríparas). Diferenças significativas (P<0,05), detectadas por análises de variância, entre os três grupos considerados foram verificados para as variáveis ilioisquiática externa, biilíaca média, sacropúbica, biisquiática interna, área da elipse, área do retângulo envolvente e perímetro torácico de bezerros. As estimativas de correlações, entre medidas externas de pelve e medidas externas de bezerros e entre medidas internas da pelve e medidas externas de bezerros foram de baixa magnitude, indicando ausência de associações entre as diferentes medidas.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Effects of desflurane, sevoflurane and isoflurane on respiratory and hemogasometrics variables in dogs | Efeitos do desfluorano, sevofluorano e isofluorano sobre variáveis respiratórias e hemogasométricas em cães
2003
Silvio Emilio Cuevas Martins | Newton Nunes | Márlis Langenegger de Rezende | Paulo Sergio Patto dos Santos
The aim of this work was to evaluate, comparatively, the effects of three volatile anesthetics upon respiratory and haemogasometric variables in dogs. For such, 30 adult, male and female healthy mongrel dogs were used. The animals were separated in 3 groups of 10 dogs each (G1, G2 and G3). General anesthesia was induced with intravenous administration of propofol (10±1,3 mg/kg). The dogs were submitted to inhalatory anesthesia with desflurane (G1), sevoflurane (G2) and isoflurane (G3), diluted in oxygen at 100,00%, through a semi-closed type anesthetic circuit. The following variables were studied: Respiratory Rate, End Tidal CO2, Pulse Oximetry, Tidal Volume, Minute Volume, Arterial O2, Arterial CO2, Bases Excess and pH. The statistical evaluation was accomplished by Profile Analisys (p<0,05). The results allowed us to conclude that desflurane depresses the respiratory system increasing the arterial CO2 and the End tidal CO2; and decreasing arterial O2 and minute volume, when compared with the other anesthetics in test. | Com este estudo objetivou-se avaliar, comparativamente, os efeitos de três anestésicos inalatórios sobre variáveis respiratórias e hemogasométricas em cães. Para tal, utilizaram-se 30 cães sadios, adultos, machos e fêmeas evitando-se aquelas em estro ou em gestação. Os animais foram separados e protocolados em três grupos de 10 cães cada (G1, G2 e G3). Induziu-se a anestesia geral com administração intravenosa de propofol, na dose de 10±1,3 mg/kg. Em seguida procedeu-se à intubação orotraqueal e anestesia geral inalatória pelo desfluorano (G1), sevofluorano (G2) e isofluorano (G3), diluídos em oxigênio a 100,00%, por meio de circuito anestésico tipo "semi-fechado", dotado de vaporizadores calibrados para cada agente anestésico. As variáveis estudadas foram Freqüência Respiratória, CO2 ao Final da Expiração, Saturação de Oxihemoglobina, Volume Corrente, Volume Minuto, Pressão Parcial Arterial de O2, Pressão Parcial Arterial de CO2, Excesso de Bases e pH. A avaliação estatística destas variáveis foi realizada pela Análise de Perfil, sendo considerado o nível de significância de 5,00%. Os resultados obtidos permitiram concluir que o desfluorano deprime o sistema respiratório aumentando a pressão parcial arterial de CO2 e o CO2 ao final da expiração; e diminuindo a pressão parcial arterial de O2 e o volume minuto, quando comparado com os outros anestésicos em teste.
اظهر المزيد [+] اقل [-]Avaliação da infecção experimental por Toxoplasma gondii (Nicolle e Manceuax, 1909) em suínos pelas provas de bioensaio em camundongos e reação em cadeia pela polimerase | Evaluation of experimental Toxoplasma gondii (Nicolle and Manceaux, 1909) infection in pigs by bioassay in mice and polymerase chain reaction
2003
Lucia Eiko Oishi Yai | Manoella Compostrini Barreto Vianna | Rodrigo Martins Soares | Adriana Cortez | Roberta Lemos Freire | Leonardo José Richtznhain | Solange Maria Gennari
O objetivo desse trabalho foi o de padronizar uma técnica de reação em cadeia pela polimerase, nested PCR, para detectar Toxoplasma gondii em tecidos de suínos infectados experimentalmente e comparar os resultados obtidos com a técnica padrão de isolamento, o bioensaio em camundongos Para testar a técnica padronizada, foram inoculados, oralmente, oito suínos com quatro meses de idade, com 5x10(4) oocistos de Toxoplasma gondii (cepa AS-28) e três suínos com a mesma idade, não infectados, foram mantidos como controles. Todos os animais foram sacrificados 47 dias após a infecção e colheu-se amostras de cérebro, coração, língua e retina de cada animal para as provas de bioensaio e PCR. Pela prova de bioensaio foi isolado o parasita quatro dos animais inoculados, sendo dois na retina, um no coração e um na língua. O DNA de Toxoplasma gondii foi detectado em cinco dos suínos inoculados, sendo: em três dos animais na língua, em dois no cérebro e no coração e na retina de um dos animais. O limiar de detecção da nPCR foi de 10 taquizoítas/mL de suspensão de cérebro de camundongos artificialmente contaminada. Nenhuma das técnicas detectou o agente em todos os animais inoculados, entretanto a nPCR, apresentou maior capacidade de detecção e menor tempo para a obtenção do diagnóstico. A utilização das técnicas em associação foi capaz de detectar o agente em sete dos animais inoculados. A única forma de melhorar a sensibilidade do método seria aumentando a quantidade de tecido a ser examinado. | The aim of the present experiment was to standardize a nested polymerase chain reaction (nPCR) for the detection of Toxoplasma gondii in tissues of experimentally infected pigs and to compare the performance of nPCR with the standard isolation technique, the bioassay in mice. Comparison between the two methods was done testing eight 4 month-old pigs orally inoculated with 5 x 10(4) oocysts of Toxoplasma gondii (AS-28 strain) and three non-infected pigs at the same age, kept as control. All animals were euthanatized 47 days after infection and samples of brain, heart, tongue and retina were collected from each animal for analysis by nPCR and bioassay in mice. By using the bioassay, Toxoplasma gondii was detected in 4 infected pigs, being two in the retina, one in the heart and one in the tongue. Toxoplasma gondii DNA was detected in five of the inoculated pigs, being: three in the tongue, two in the brain and heart and one in retina. The detection threshold of the nPCR on mouse brain suspension artificially infected with the RH strain of Toxoplasma gondii was 10 tachyzoites/ml. Although both techniques were unable to detect the parasite in all infected pigs, nPCR showed better performance as it was accomplished in a shorter period of time. When used concurrently, both techniques detected the agent in seven infected animals. The only way to increase sensitivity of either method is to increase the amount of tissue to be examined.
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