RESUMO A disponibilidade de água e o tipo de substrato são requisitos essenciais para a condução do teste de germinação em sementes, por influenciarem na embebição e no desenvolvimento das plântulas. Objetivou-se avaliar a influência de dois substratos e diferentes volumes de água sob a germinação e vigor de sementes de chia. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 6, sendo dois substratos substratos de papel toalha (Germitest®) e mata-borrão umedecidos com seis volumes de água equivalentes a 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5 e 4,0 vezes o seu peso seco, em quatro repetições de 50 sementes. Avaliou-se a percentagem e o tempo médio de germinação, comprimento da parte aérea e da radícula, massa seca da parte aérea, radícula e total (plântula) e a relação raiz/parte aérea. O teste de germinação de sementes de chia deve ser conduzido no substrato mata-borrão (sobre papel) com quantidade de água entre 2,5 a 4,0 vezes o peso do papel seco. As plântulas de chia oriundas do papel mata-borrão obtiveram maior crescimento e acúmulo de matéria seca em relação às do papel toalha | ABSTRACT Water availability and substrate type are essential factors in seed germination tests, influencing imbibition and seedling development. The objective of this study was to evaluate the influence of two substrates and different water volumes on the germination and vigor of chia seeds. The experimental design was completely randomized in a 2 x 6 factorial scheme, which consisted of two substrates, paper towel (Germitest®) and blotting paper, soaked with six water volumes equivalent to 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, and 4.0 times their dry weight, in four replicates of 50 seeds each. Germination percentage, mean time of germination, shoot length, radicle length, shoot dry matter, radicle dry matter, total dry matter (seedling), and root/shoot ratio were evaluated. Based on our results, germination tests for seeds of chia should be conducted using blotting paper (on paper) as substrate, with a water volume of 2.5 to 4.0 times its dry weight. Chia seedlings grown on blotting paper showed greater growth and dry matter accumulation compared to those grown on paper towel.