Quantificação de Salmonella sp. em fezes suínas por PCR em tempo real.
2016
PAIM, D. S. | MALGARIN, C. M. | KICH, J. D.
Portuguese. Salmonellasp. é uma bactéria capaz de colonizar o trato gastro-intestinal dos seres humanos e animais. O suíno é uma importante fonte de infecção, pois elimina a bactéria de forma intermitente nas fezes contaminando o ambiente de criação e abate. Além disso, alguns animais podem excretarquantidades maiores desta bactéria, sendo considerados super-excretores. Desta forma, são necessárias técnicas de quantificação bacteriana para a identificação desses animais. Entre estas técnicas de PCR em tempo real se destaca devido sensibilidade e rapidez nos resultados. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de uma curva de quantificação de Salmonella sp. em fezes de suínos. Para tanto, fezes suínas foram contaminadas com inóculo de Salmonella sp. em diluições seriadas e incubadas em água peptonada tamponada por seis horas. Alíquotas de 1 mL foram retiradas para extração do DNA que foi padronizado a 10 ng/μL. A reação de qPCR foi realizada utilizando-se o sistema SYBR Green, com alvo no gene Hill A. A contagem na diluição 10-5 foi 1,1 x 103 UFC/mL seguida de 14,33 x 101UFC/mL e 2,67 x 101UFC/mL para as diluições 10-4e 10-3respectivamente. As médias dos CT obtidos nas 10 repetições variaram de 15,54 a 32,10. Os resultados das contagens foram associados aos respectivos CTe foi possível obter uma curva de quantificação de Salmonellaque poderá ser aplicada a identificação de suínos excretores.
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