Perfil eletroforético, características estruturais e fertilidade in vitro do sêmen de touros Nelore submetidos à degeneração testicular por insulação.

Portuguese. O presente estudo objetivou identificar o perfIl eletroforético seminal, as características do espermograma e fertilidade in vitro, do sêmen de touros proveniente dos períodos pré e pós-indução do processo degenerativo testicular por insulação. Para isso, foram selecionados quatro animais da raça Nelore, com idade entre trinta e trinta e seis meses. Amostras de sêmen foram colhidas três dias antes (PO) da indução do processo degenerativo e, sete (P7), quatorze (PI4) e vinte e um (P21) após a retirada do insulto testicular com cinco dias de duração. Para a análise dos dados foram considerados três experimentos: 1) efeito dos períodos experimentais (PO, P7, P14 e P21) sobre o espermograma e perfil eletroforético do plasma seminal e membrana plasmática dos espennatozóides; 2) efeito dos períodos experimentais e seleção espennática por gradiente de Percoll sobre as características seminais e-3) fertilidade in vitro e associação com características seminais oriundas do período pré e pós-insulto testicular. No experimento 1, os espermogramas foram avaliados por métodos convencionais, coloração de Fuelgen para estimativa do percentual de fragmentação nuclear (FN) e, perfil eletroforético do plasma seminal e espermatozóides por SDS- P AGE a 12,5%. Os resultados mostraram que as taxas da motilidade e dos espermatozóides morfologicamente normais foram menores (P<0,05) a partir do P14. A taxa dos defeitos FN nos P14 (33,2 +-3,42) e P21 (28,8 +-3,63) foi maior àquela dos defeitos de cabeça (CAB), 9,5 +-0,90 e 17,4 +-2,31, respectivamente. No plasma seminal, o perfil eletroforético revelou proteínas de 10 a 35 kDa, em todos os períodos experimentais, porém, houve variações entre indivíduos e períodos quanto a presença das proteínas de 50, 85 e 105 kDa. Nos espermatozóides, apenas um reprodutor apresentou aparente perda de proteínas na faixa de 25 a 60 kDa, após a indução da ... Das características seminais, FN explicou a maior variação nas freqiiências de clivados e blastocistos (R2=0,16 e 0,27), respectivamente. Esses resultados mostram que, houve distúrbios na funcionalidade testicular frente ao estresse térmico por insulação, confirmada pelas variações do perfil eletroforético do plasma seminal e membrana plasmática dos espermatozóides. As alterações morfológicas, provocadas por agressão térmica testicular, especialmente as funcionais, associadas à cromatina espermática, afetaram a fecundação e o desenvolvimento embrionário. Portanto, é imprescindível a utilização de métodos para determinação das alterações estruturais e moleculares, para auxiliar na predição do potencial de fecundação de reprodutores envolvidos em programas de reprodução assistida, principalmente, na transferência e fertilização in vitro de embriões.

Portuguese. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP. Orientador: Antônio Emídio Dias Feliciano da Silva; Co-Orientadora: Margot Alves Nunes Dode.