ADAPTATION OF THE BHK 21 C13 CELL LINE TO THE GROWTH IN SUSPENSION FOR PIG VIRAL VACCINES | ADAPTACIÓN DE LA LÍNEA CELULAR BHK21 CLON 13 AL CRECIMIENTO EN SUSPENSIÓN PARA VACUNAS VIRALES PORCINAS

Spanish; Castilian. Este trabajo tuvo como objetivo la obtención de un cultivo celular en suspensión a partir de la adaptación de la línea celular estacionaria BHK21 C13, exriñón de hámster. Las condiciones de cultivo fueron las siguientes: volumen final de 80 mL, temperatura de incubación 37ºC y agitación de 300 rpm. La concentración inicial de células en cada pase fue de 1x106células/mL. Se sustituyó el uso del suero fetal bovino a través del aumento creciente del suero de ternero en cada pase celular en medio de cultivo Eagle MEM (medio mínimo esencial, acrónimo en inglés). Se determinó la cinética de crecimiento de las células BHK21 C13 durante un período de 120 horas. Las células se adaptaron al crecimiento en suspensión a partir del tercer pase aproximadamente. El perfil de crecimiento de las células de BHK21 C13 mostró que la fase exponencial de crecimiento de las células duró 72 horas, obteniendo una densidad celular de 42x106células/mL. A partir de ese momento comenzó la fase de meseta Se obtuvieron diferencias significativas (P0.05) en el crecimiento de las células suplementadas con suero de ternero con respecto al control suplementado sólo con suero fetal bovino. Mediante este estudio se logró la obtención de un cultivo en suspensión de las células BHK 21 clon13 en condiciones experimentales cubanas. El uso futuro de las células en suspensión de BHK21 C13 proveerá un método simple y eficiente para la propagación viral en la producción de vacunas porcinas.

English. The aim of this work was to assess a cell culture suspension from the BHK21 C13, exhamster kidney, cell line adaptation for pig viral vaccines manufacture. Culture conditions were the following: final volume of 80 mL, incubation temperature of 37 ºC and 300 rpm of speed agitation. Initial cell concentration in all transferences was 1x106 cells/mL. The use of foetal bovine serum was replaced by calf serum increase in cell transference in culture medium of Eagle MEM (minimal essential medium). Growth kinetics of BHK21 C13 cells was determined during a period of 120 hours. Cells were adapted to the suspension growth approximately in the third transference. The growth profile of BHK21 C13 cells showed the exponential growth phase during 72 hours and maximum cell density was 42x106 cells/mL. Thereafter the plateau phase was initiated. There were significant differences (P0.05) for growth of cells supplemented with calf serum with respect to the control only supplemented with foetal bovine serum. In conclusion, the herein described technique allowed the assessment of a BHK21 C13 suspension culture according to the designed Cuban experimental conditions. The future use of BHK21 C13 cells in suspension cultures will provide a simple and efficient method for viral propagation for development of porcine vaccines production.