Comparative analysis of in vitro development of outbred mouse embryos cultured in Krebs-Ringer or tyrode-derived media [preimplantation stages]
1997
Uranga, J.A. (University of the Basque Country, Leioa (Espagne). Medical School, Department of Cell Biology, Laboratory of Experimental and Molecular Embryology) | Arechaga, J.
French. Les milieux de culture adaptes au developpement preimplantatoire de la souris sont habituellement derives de deux solutions de base: Krebs-Ringer et Tyrode. On a utilise des souris non consanguines (OFI) pour effectuer une analyse comparative de milieux derives des deux types et de leur efficacite pour assurer le developpement du stade une cellule au stade blastocyste. Les meilleurs resultats (jusqu'a 50 %), en ce qui concerne le depassement du bloquage au stade deux cellules et le maintien du developpement jusqu'au stade blastocyste, ont ete obtenus avec des milieux derives de la solution de Tyrode et avec des milieux derives du Krebs-Ringer dans lesquels les fortes concentrations de metabolites (Cl-, K+, Mg2+ et PO43+) ont ete reduites aux valeurs presentes dans les milieux derives du Tyrode. Remarquablement, le milieu T6 (base sur le Tyrode et incapable d'eviter le bloquage de lui-meme) permet le meilleur taux de developpement apres addition d'EDTA. La glutamine ajoutee au milieu T6 n'a aucun effet. On a ensuite developpe le milieu T7, base sur T6 mais incorporant les concentrations de nutriments presents dans l'oviducte. Ce milieu s'est avere meilleur que sa contrepartie basee sur le Krebs-Ringer (MTF), bien qu'il ne soit pas meilleur que T6, probablement a cause du changement d'exigences nutritives lors de la transition morula-blastocyste. Les deux resultats importants sont: i. les formules basees sur le Tyrode sont superieures a celles basees sur le Krebs-Ringer; ii. le milieu T6 avec EDTA est aussi efficace pour la culture de l'oeuf de souris que le milieu KSOM developpe recemment
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