Régulations multiples de l’expression de l’invasine Rck de Salmonella Typhimurium médiant une invasion de type Zipper

French. L’entérobactérie Salmonella est un pathogène intracellulaire facultatif, responsable des salmonelloses humaines et animales. Le caractère pathogène de Salmonella est étroitement dépendant de sa capacité à entrer et à se multiplier dans les cellules de l’hôte. Jusqu’à présent, le seul système d’entrée décrit pour les salmonelles était un appareil de sécrétion de type III (T3SS), le T3SS-1 (3). Récemment, nous avons caractérisé in vitro un nouveau système d'entrée de Salmonella impliquant une protéine de la membrane externe, Rck (4). Afin de mieux comprendre les conditions physiologiques d’expression de Rck, nous avons caractérisé la transcription du locus pefI-srgC, qui porte le cadre ouvert de lecture (ORF) rck et étudié le mécanisme de régulation exercé par le régulateur transcriptionnel du quorum sensing SdiA et par les protéines Hha et YdgT impliquées dans le contrôle de l’expression de gènes acquis par transfert horizontal. Après avoir confirmé la régulation transcriptionnelle du locus pefI-srgC par SdiA décrite par Ahmer et al. (2), nous avons montré que les six ORFs de ce locus étaient organisés en opéron. L’utilisation de fusions transcriptionnelles a permis d’identifier 2 promoteurs en amont de pefI, dont un (P2) est dépendant de SdiA. Ce site d’initiation de la transcription a été identifié 352 bases en amont de pefI et nous avons montré par des expériences de gel retard et des analyses de résonance plasmonique de surface que la protéine SdiA interagit avec la région promotrice P2. Ces résultats sont la première démonstration d’une régulation directe de gènes par SdiA chez Salmonella et suggèrent un rôle de Rck dans la colonisation de l’intestin (1). Cependant, cette régulation n’était observable de manière nette qu’en surexprimant SdiA, suggérant ainsi une régulation négative de la transcription de l’opéron. Nos travaux récents ont démontré que les nucléoprotéines Hha et YdgT régulaient négativement l’expression de l’invasine Rck. La régulation du gène rck par les nucléoprotéines Hha et YdgT ne s’exerce pas sur les promoteurs situés en amont de pefI, mais dans une région promotrice au début de orf6, dernier ORF de l’opéron pef, situé juste en amont de l’opéron pefI-srgC et qui code des fimbriae impliqués dans l’adhésion des bactéries aux entérocytes. Ce résultat suggère donc un lien fonctionnel entre l’invasine Rck et les fimbriae Pef. L’ensemble de ces travaux devrait nous aider à mieux comprendre les conditions d’expression de Rck in vivo et, par conséquent, son rôle dans la pathogénie de Salmonella qui reste pour l’instant à démontrer.