Evaluación del cultivo de anteras y el cocultivo de microesporas de chile (Capsicum annum L.) con ovarios de chile y Sorgo (Sorghum bicolor L.)” y “Regeneración in vitro de Loroco (Fernaldia pandurata W.)

El cultivo in vitro de anteras y el cultivo de microesporas son técnicas mediante las cuales se pueden obtener plantas haploides. En chile (Capsicum annum L.) estas técnicas no han sido aplicadas con total éxito, debido a la recalcitrancia de la especie y la dependencia de la respuesta al genotipo. En el presente trabajo se estudió microscópicamente los diferentes estados de desarrollo de las microesporas de dos variedades de chile (Capsicum annum L.) Var. Largo de Reus y Dulce Italiano. Posteriormente, se establecieron diferentes ensayos mediante el aislamiento de microesporas de chile y su cocultivo con ovarios de sorgo (Sorghum bicolor). De igual forma, se investigó el cultivo de anteras de chile mediante el uso de medios de cultivo suplementados con las sales minerales de Gamborg B5 (1968). Todos los ensayos se realizaron bajo un diseño completamente al azar. Se logró determinar el estado binucleado temprano de los granos de polen como primer paso al aislamiento de las microesporas. El cocultivo de microesporas de polen y ovarios de sorgo no mostró una respuesta favorable a la regeneración, para la variedad chile Capsicum annum L. var. Largo de Reus (LR), esto por el protocolo utilizado en el aislamiento de las microesporas. Los callos desarrollados se obtuvieron mediante el cultivo de anteras en cajas Petri, mantenidos en oscuridad durante un período de dos meses a 25±1°C.Posteriormente, se transfirieron al medio regenerativo R1 modificado (Lantos, 2009) y mantenidos en condiciones de fotoperiodo de 16h luz/8h oscuridad, a 1,500-2,000 lux y 25±1°C. Se logró así el establecimiento de un protocolo del cultivo in vitro de anteras de Capsicum annum (var. Largo de Reus) adaptado a los recursos y equipos disponibles en el laboratorio. Por otro lado, se evaluó la regeneración in vitro de Loroco (Fernaldia pandurata W), a través del uso de segmentos nodales. En este estudio se utilizaron medios Murashigue y Skoog (1962) en combinación de tres diferentes reguladores de crecimiento. Se encontró que el uso de Bencilaminopurina (BAP) a razón de 1mgl-1, 1mgl-1 BAP+1mgl-1 Kinetina y el uso de Kinetina a razón de 5.0mgl-1 mostraron mejores respuestas en relación a número de brotes y crecimiento vegetativo. Estos dos aspectos son fundamentales dentro del desarrollo de plántulas y posteriores estudios de micropropagación in vitro y aclimatación de esta especie