Biochemical and molecular characterization of plant-parasitic nematodes
2004
O. Obrantes, I.M. De (Coimbra Univ. (Portugal). Dept. de Zoologia) | Santos, M.C.V. Dos (Coimbra Univ. (Portugal). Dept. de Zoologia) | I. Luci da Conceicao, P.M. (Coimbra Univ. (Portugal). Dept. de Zoologia) | Da Cunha, M.J.M. (Coimbra Univ. (Portugal). Dept. de Zoologia) | Santos, M.S.N.A. De (Coimbra Univ. (Portugal). Dept. de Zoologia)
English. The identification of plant-parasitic nematodes is not always easy and that of some species is especially difficult. Most of the information aimed at characterizing and identifying specimens is based on morphological and morphometric characters. Although these characters are of primary importance, in the last three decades they have been supplemented by biochemical and molecular characters. Biochemical approaches include the separation of proteins (general proteins and isozymes) by one-dimensional gel electrophoresis, isoelectric focusing, two-dimensional gel electrophoresis and sodium dodecyl sulphate-capillary gel electrophoresis. Serology has also been found effective in the identification and quantification of nematodes, monoclonal antibodies being a more useful immunological tool than polyclonal antibodies. Identification based on the direct examination of DNA is potentially a more powerful method to characterize inter- and intra-specific variability. The development of techniques such as PCR, RFLP, RAPD and AFLP has increased the accuracy and speed of nematode characterization and identification. Progress continues to be made and more and more nematologists are using molecular techniques for diagnostic purposes and to assess genetic variation
Show more [+] Less [-]Italian. [L´identificazione dei nematodi parassiti delle piante non è sempre facile e quella di alcune specie è particolarmente difficoltosa. La maggior parte delle informazioni utilizzate per la caratterizzazione e l´identificazione dei campioni è basata sui caratteri morfologici e morfometrici. Sebbene questi caratteri siano di importanza primaria, nelle ultime tre decadi sono stati integrati da caratteri biochimici e molecolari. Gli approcci biochimici comprendono la separazione delle proteine (proteine in generale e isoenzimi) mediante gel elettroforesi monodimensionale, focalizzazione isoelettrica, gel elettroforesi bidimensionale e gel elettroforesi capillare con sodio dodecilsolfato. Anche la sierologia è risultata efficace per l´identificazione e la quantificazione dei nematodi, con una maggiore utilità degli anticorpi monoclonali rispetto ai policlonali. L´identificazione basata sull´esame diretto del DNA è potenzialmente un metodo più efficace per caratterizzare la variabilità inter- e intraspecifica. Lo sviluppo di tecniche come PCR, RFLP, RAPD e AFLP ha incrementato l´accuratezza e la rapidità di esecuzione della caratterizzazione e identificazione dei nematodi. Si continuano a registrare progressi e i nematologi usano in misura progressivamente maggiore le tecniche molecolari per scopi diagnostici e per l´accertamento della variazione genetica.]
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