Characterization of autolytic enzymes in Lactobacillus casei subsp. casei 1St261 [Grana cheese]
1996
Cappa, F. | Bottazzi, V. (Universita Cattolica del Sacro Cuore, Piacenza (Italy). Istituto di Microbiologia)
English. Autolysis was studied in Lactobacillus casei subsp. casei 1St261 by turbidimetric method, following the decrease of optical density at 650 nm. Autolytic enzymes were analyzed in whole cells, cell walls and in supernatant culture. The enzyme profile was the same both for whole cells and for cell walls; four bands of 77, 71, 55 and 49 kDa corresponding to different autolytic enzymes were detected when the autolysis was analyzed by renaturing polyacrylamide gel electrophoresis. The most active enzyme, corresponding to the 55 kDa band, was also found in the supernatant culture. Another band of 16 kDa was found in the presence of 10 mM MnCl2, whereas the above four enzymes were inhibited. The zymogram analysis showed the inhibitory effect of the heavy metals Cu sup(2+), Hg sup(2+), Zn sup (2+) on bacteriolytic enzymes; EDTA, Na sup(+) and Ca sup (2+) had a depressive action too, whereas Mg sup(2+) and K sup(+) enhanced the lytic action
Show more [+] Less [-]Italian. Si e' studiata l'autolisi in Lactobacillus casei subsp. casei 1St261 con metodo turbidimetrico, analizzando la diminuzione di densita' ottica a 650 nm. Gli enzimi autolitici sono stati ricercati nelle cellule intere, nelle pareti cellulari e nel surnatante della coltura cellulare. Il profilo enzimatico ritrovato e' lo stesso sia per le cellule intere che per le pareti cellulari; quattro bande di 77, 71, 55 e 49 kDa corrispondenti a enzimi autolitici, sono state trovate quando l'autolisi era analizzata tramite elettroforesi in gel di poliacrilamide rinaturante. L'enzima piu' attivo corrispondente alla banda di 55 kDa e' stato trovato anche nel surnatante della coltura. In presenza di 10 nM MnCl2 e' stata rilevata un'altra banda di 16 kDa, mentre gli altri enzimi sono stati inibiti. Lo zimogramma ha messo in evidenza l'effetto inibitore degli enzimi autolitici dei metalli pesanti Cu sup(2+), Hg sup(2+), Zn sup (2+); l'EDTA, il Na sup(+) e il Ca sup (2+) hanno diminuito l'attivita' enzimatica, mentre Mg sup (2+) e K sup(+) hammo migliorato l'attivita' litica
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