Occurrence of peach latent mosaic viroid in China and development of an improved detection method [Prunus persica (L.) Batsch]
1998
Turturo, C. | Minafra, A. | Savino, V. (Bari Univ. (Italy). Dipartimento di Protezione delle Piante) | Ni, H. | Wang, G. (Research Institute of Pomology, Xingcheng (China). Dept. of Plant Protection) | Di Terlizzi, B. (Istituto Agronomico Mediterraneo, Valenzano, Bari (Italy))
English. Peach latent mosaic viroid (PLMVd) was detected by indexing on peach "GF-305" seedlings and by molecular hybridization with a digoxigenin-labelled riboprobe, in 9 out of 14 peach samples from the Liaoning province of the People's Republic of China. For molecular assays four different tissue processing methods were compared, two involving total nucleic acid (TNA) extraction with or without organic solvents, followed by formaldehyde or alkaline denaturation, and two based on direct denaturation of crude leaf sap. All extracts, regardless of the method used, gave positive hybridization signals, but alkaline denaturation increased the sensitivity of detection in both TNA and crude sap preparations. Because of its simplicity and minimal manipulation, alkaline denaturation of crude sap appears to be the best method for routine detection of PLMVd
Show more [+] Less [-]Italian. Il viroide del mosaico latente del pesco e' stato identificato in 9 su 14 piante di pesco della provincia cinese di Liaoning sia con indexaggio sull'indicatore "GF-305", sia con ibridazione molecolare con una ribosonda marcata con digossigenina. Per i saggi molecolari sono stati provati quattro metodi di preparazione del campione, due dei quali prevedevano l'estrazione dell'RNA totale con solventi organici o no, e due erano basati sulla denaturazione diretta di succo fogliare con formaldeide o con idrossido di sodio. Tutti i tipi di estrazione, indipendentemente dal metodo adoperato, hanno dato risultati positivi alla ibridazione. La denaturazione alcalina, tuttavia, ha aumentato la sensibilita' delle reazioni, per cui, a causa della semplicita' e della scarsa manipolazione che richiede, il trattamento con soda di estratti grezzi di succo fogliare appare come il metodo piu' indicato per la diagnosi di routine
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