Cryopreservacion of native isolates of ruminal bacteria Fibrobacter succinogenes | Determinacion de la excrecion total de alantoina en suero de leche mediante Cromatografia Liquida de alta Eficiencia (HPLC) en vacas Holstein alimentadas con pasto Kikuyo (Pennisetum clandestinum)

Spanish; Castilian. bSumarios (en, es)Se realizo un experimento con vacas Holstein con el fin de medir la excrecion de alantoina en la leche. Se utilizaron tres hembras en la fase final de la lactancia, pertenecientes al hato de ordeño del C.i. Tibaitata, que se alimentaron bajo confinamiento con pasto Kikuyo cortado diariamente de praderas pastoreadas por el hato completo. el experimento tuvo una duracion de 14 dias: siete de acostumbramiento y siete de muestreo, durante los cuales las vacas se alimentaron dos veces por dia. Se media el forraje ofrecido y el rechazado al dia siguiente; asi mismo, se tomaron 200 ml de leche de cada hembra, en los dos ordeños, durante los siete dias de muestreo. Se midio el valor diario de alantoina en suero de leche, valor que se utilizo para calcular la cantidad digerida de nitrogeno microbial y para relacionarla con la materia organica digerida (MoD). estos resultados se compararon con los generados en simulacion por el programa CNCPS. Con el metodo colorimetrico los resultados fueron variables y poco satisfactorios. Con HPLC, la concentracion de alantoina en suero de leche vario entre 2.74 mMol y 7.99 mMolúL-1. Los valores calculados de flujo de N microbial al intestino fueron de 260.4 ñ 32 g dia-1, equivalentes a 1.628 g de proteina microbial digerida. el consumo de forraje fue de 12.1 kg de MS vaca/dia-1 (2.35 del peso vivo). La eficiencia de la sintesis de proteina microbial estimada fue de 55.3 gúkg-1 de MoD. La cuantificacion cromatografica de alantoina se acerco a los valores reportados por la literatura y a las estimaciones de NM obtenidas por simulacion con CNCPS (18 de desviacion). Cuando se incluyo el consumo de MS, la estimacion de NM se acerco al valor de simulacion (13 de desviacion), considerandose que la cuantificacion de alantoina por HPLC es un metodo aceptable

English. An experiment was carried out to deter-mine allantoin excretion in late lactation dairy cows, using tree multiparous (four lactations or more) Holstein cows, fed exclusively on kikuyu grass (Pennisetum clandestinum). The experiment was completed in 14 days, with 7 days of diet adjustment and 7 days of milk sampling and feed intake measurement. Allantoin measurement was performed both by HPLC and colorimetric methods. The estimated rumen microbial nitrogen was compared with that obtained from the CNCPS prediction, using simple regression analysis. The daily allantoin value was used to calculate allantoin production and total microbial N, which was correlated with the OM digested during the seven experimental days. Measurements of allantoin by HPLC ranged from 2.74 to 7.99 mMolúL-1 which corresponded to 260.4 ñ 32 gúd-1 of microbial N, or 1628 gúd-1 of microbial protein. Feed intake was 12.1 kgúDMúd-1 per cow (2.35percentage live weight). Efficiency of microbial synthesis was 55.3 gúkg-1 of OM digested. Results by the chromatographic method were similar to those reported elsewhere and the estimation of Mic N was similar to that estimated with CNCPS (18percentage bias). When DMI was added to the model, estimated Mic N was closer to the CNCPS prediction (13percentage bias). Results suggest that allantoin quantification by HPLC, is a reliable method to determine allantoin concentration in milk serum