Advantages of application of polymerase chain reaction for diagnosis of brucellosis of small ruminant | Преимущества применения полимеразной цепной реакции для диагностики бруцеллеза мелкого рогатого скота

English. Experiments were realized in the districts of the Republic of Tajikistan which were not been satisfactory by brucellosis (BR). The post-mortem material obtained from 33 aborted fetus of small ruminants was researched on BR by the method of polymerase chain reaction (PCR) The samples of the gastric contents and parenchymatous organs (liver, spleen, lymph nodes) were researched by bacterial inoculation of selective enrichment medium and by Kozlovsky and Shuliak-Shin staining. Pure cultures were identified by reaction of agglutination. Brucella abortus DNA fragments were detected by PCR. The analysis showed the DNA of BR causative agent is present in 26 samples (or 78% of cases). The results of a bacteriological study by bacterial inoculation of enrichment medium allowed us to identify the characteristic growth of pure cultures of 18 samples (54.5%). Kozlovsky and Shuliak-Shin staining showed a positive result in 42.4-30.3% of cases, respectively. PCR analysis confirmed the presence of Brucella abortus DNA in all 18 seropositive samples; simultaneously, it revealed such DNA in 8 samples; (24.2% of the number studied in total) additionally. High sensitivity and diagnostic efficiency of the PCR method provide verification of the diagnosis throughout the infection process as whole. BR can be detected in chronically suffering animals.

Russian. Эксперименты проводили в районах Республики Таджикистан, неблагополучных по бруцеллезу (БР). Патматериал, полученный от 33 абортированных плодов мелкого рогатого скота, исследовали на БР методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Бактериологические исследования образцов содержимого желудка и паренхиматозных органов (печень, селезенка, лимфатические узлы) проводили методом посева на селективные среды и окрашивания по Козловскому и Шуляку-Шину. Чистые культуры идентифицировали путем постановки реакции агглютинации. Фрагменты ДНК Brucella abortus выявляли методом ПЦР. Анализ показал наличие ДНК возбудителя БР в 26 пробах или 78% случаев. Результаты бактериологического исследования путем посева на питательные среды позволили выявить характерный рост чистых культур в 18 образцах (54,5%). Методы окрашивания мазков показали положительный результат в 42,4-30,3% случаев. ПЦР-анализ подтвердил наличие ДНК Brucella abortus во всех 18 сероположительных пробах, при этом он позволил выявить ДНК возбудителя в 8 дополнительных пробах (24,2% от числа изученных). Высокая чувствительность и диагностическая эффективность метода ПЦР обеспечивают верификацию диагноза на всем протяжении инфекционного процесса. БР может быть выявлен у животных с длительным хроническим течением болезни.