An alternative method for Staphylococcus aureus DNA isolation
2008
Chapaval, L.(Embrapa) | Moon, D.H.(USP Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz) | Gomes, J.E.(USP Centro de Energia Nuclear da Agricultura) | Duarte, F.R.(USP Centro de Energia Nuclear da Agricultura) | Tsai, S.M.(USP Centro de Energia Nuclear da Agricultura)
Portuguese. Descreve-se um procedimento rápido para extração de DNA genômico de isolados de Staphylococcus aureus capaz de produzir DNA estafilocócico em qualidade e quantidade suficiente para a amplificação de genes que codificam enterotoxinas estafilocócicas (A - E) e para TSST-1 e restrição enzimática (HaeIII) de isolados ambientais. O método proposto foi capaz de detectar esses genes em um produto de extração contendo tanto quanto 10(5) células, e reações positivas de PCR foram obtidas de aproximadamente 10pg de DNA.
Show more [+] Less [-]English. This study describes a rapid procedure for the isolation of genomic DNA from Staphylococcus aureus that yielded a good amount of high quality DNA for the amplification of staphylococcal enterotoxins genes (A, B, C, D, and E) and the TSST-1 gene as well as enzymatic restriction (HaeIII) from environmental isolates. With this method, it was possible to detect these genes in a sample containing as little as 10(5) cells with positive PCR reactions obtained from approximately 10pg of DNA in a final reaction volume of 25µl.
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