Amber particles as living plant cell markers in flow cytometry | Dzintara daļiņas kā dzīvu augu šūnu marķieri plūsmas citometrijā

Latvian. Labi zināma ir dzintara labvēlīgā ietekme uz dažādiem organismiem, tomēr ir ļoti maz pētījumu par dzintara ietekmi uz augu šūnām. Tādēļ šī pētījuma mērķis bija noskaidrot nano un mikro lieluma (5 nm-3 μm) dzintara daļiņu un dzintara komponentu (spirtā šķīstošā dzintara frakcija un sukcināta) ietekmi uz augu somatiskajām un gametiskajām šūnām, un noskaidrot dzintara daļiņu piemērotību dzīvu augu šūnu iezīmēšanai urbānās vides pētījumiem, izmantojot plūsmas citometriju. Relatīvā fluorescence, izmantojot BD FACSJazz® šūnu šķirotāju ar plūsmas citometra funkciju, tika noteikta èetru dažādu ģinšu sugu (Argyranthemum frutescens, Cyclamen persicum, Hordeum vulgare, Linum usitatissimum) augu šūnām pēc 2 un 24 stundu kultivācijas barotnēs ar un bez dzintara daļiņām vai dzintara komponentiem. Konstatēts, ka dzintara daļiņu klātbūtne visām pētīto augu šūnām ievērojami palielināja relatīvo fluorescenci. Dzintara komponentu ietekme uz šūnu relatīvās fluorescences izmaiņām nebija būtiska, salīdzinot ar dzintara daļiņu ietekmi. Dzintara daļiņas nesamazināja dzīvo šūnu daudzumu paraugos. Konstatēts, ka dzintara daļiņas (5 nm-3 μm) var izmantot kā marķierus dzīvo šūnu iezīmēšanai plūsmas citometrijas pētījumos.

English. The unique biological properties of amber are well known. Amber particles that penetrate into the cellular matrix can potentially be used as markers of plant cell biological activity by identification of living cells in flow cytometry. However, there have been no studies on effect of amber particles on plant cells. The aim of this study was to determine effect of amber nano- and micro- (5 nm-3 μm) particles on somatic and gametic cells and to assess the possibility to use amber particles as alive plant cells markers. To reach the aim, fluorescence of cells was determined in the presence of amber particles, and amber components - spirit of amber and sodium succinate dibasic hexahydrate. Cell fluorescence was measured using a BD FACSJazz® cell sorter for several plants species (Argyranthemum frutescens, Cyclamen persicum, Hordeum vulgare and Linum usitatissimum) with and without treatment of amber. Differences between a control cell group (without amber treatment) and treated cell group with amber particles depended on plant species. The presence of amber components (alcohol soluble amber fraction and sodium succinate) in cultivation media mostly had no influence on cell fluorescence. The study showed that amber particles (size 5 nm-3 μm) can be used as living plant cell markers, as the presence of amber particles in plant cell cultivation media resulted in substantially increased plant cell fluorescence in all investigated species, and there was no detrimental effect of amber particles on plant cells.