Respuesta inmune humoral y celular en cobayos inmunizados con proteinas de membrana externa de Brucella abortus cepa RB51.
1995
Villamil M. | Rueda E. | Gallego I. | Marino O.C. | Gutierrez A.
Spanish; Castilian. Con el objeto de evaluar las caracteristicas de la respuesta inmune inducida y la capacidad protectora de las proteinas de membrana externa (OMP-II) de B. abortus cepa RB51, fueron seleccionados al azar cuatro grupos de 30 cobayos cada uno e inoculados via subcutanea, asi: 1) B. abortus cepa 19 viva (1.5x10 elevado a 7 ufc); 2) B. abortus cepa RB51 viva (1.5x10 elevado a 7 ufc); 3) OMP-II acoplada a albumina bovina cationizada, cBSA (400 ug totales y 4) solucion salina. Los animales fueron descargados con cepa virulenta B. abortus 2308 (1.0x10 elevado a 3 ufp), al dia 60 postinmunizacion. La respuesta inmune celular fue evaluada por el nivel de incorporacion de timidina tritiada de cultivos de linfocitos esplenicos a los dias 0, 15, 30, 45, 60 y 90 postinmunizacion (5 animales/grupo/dia). La estimulacion in vitro se realizo con antigenos purificados de mernbrana externa, OMP-II, sLPS y cadena-O, asi como antigeno soluble crudo de cepa RB51 (BASA-RB51). Cultivos pareados estimulados con Concanavalina A fueron empleados como control positivo y cultivos no estimulados sirvieron de control negativo. La prueba de ELISA indirecta fue empleada para medir la respuesta de anticuerpos anti-sLPS y anti-BASA-RB51 cada 15 dias durante los 90 dias de observacion. La respuesta protectora inducida por cada uno de los inmunogenos empleados fue medida en funcion del recuento de colonias de B. abortus, obtenido de bazo a los 15 dias despues de la descarga virulenta, Los resultados sugieren igual capacidad de proteccion al desafio conferida por OMP-II con respecto a las vacunas cepa 19 o RB51, ya que no se detecto replicacion bacteriana en el bazo despues de la descarga en ninguno de los grupos vacunados. Lo anterior confirma la capacidad protectora de la copa RB51 a niveles iguales o superiores a la cepa vacunas tradicional, cepa 19. Por otra parte, no se observo estimulacion linfocitaria significativa con respecto al control, con ninguno de los antigenos purificados empleados in vitro, en ninguno de los grupos inmunizados; se detecto transformacion inespecifico ante estimulo in vitro con BASA. Se observo diferencia estadistica significativa (p<0.01) al dia 60, correspondiente al grupo vacunado con OMP-cBSA en respuesta al antigeno OMP, sugiriendo un papel parcial de la respuesta celular en la proteccion general reportada. La respuesta humoral manifestada por los niveles de anticuerpos contra sLPS y BASA RB51 fue la esperada; sin embargo se hizo evidente el papel potencializador del adyuvante en el grupo OMP, con respecto al grupo vacunado con cepa viva RB51. Se considera de importaiicia confirmar la capacidad protectora conferida por la subunidad vacunal OMP-II, dado su potencial con respecto a las vacunas vivas, en los factores de diseminacion de la infeccion y diferenciacion diagnostica. Se discuten diferentes mecanismos involucrados en la proteccion reportada.
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