Redundancia en el control del programa genético activado por HaHSFA9

En nuestro laboratorio hemos clonado y caracterizado funcionalmente a HaHSFA9 (Helianthus annuus Heat Shock Factor A9), un factor transcripcional específico de semillas1 3. Mediante experimentos de ganancia de función en plantas transgénicas de tabaco, hemos demostrado que HaHSFA9 activa un programa genético implicado en la longevidad de las semillas y en la tolerancia a la desecación embrionaria1 2. Dicho programa incluiría como genes diana a un subconjunto de genes sHSPs (small Heat Shock Proteins, citosólicas de clases CI y CII) que se acumulan mayoritaria o específicamente en semillas durante la embriogénesis zigótica. Para confirmar el papel de las sHSPs embrionarias junto con otros genes regulados por HaHSFA9, utilizamos la estrategia de pérdida de función. Para ello, hemos sobre‑expresado específicamente en semillas de tabaco diferentes formas modificadas de HaHSFA93. Solamente con la forma M3, que convierte a HaHSFA9 en un potente represor activo, hemos observado efectos negativos tanto en la acumulación de HSPs como en la longevidad de las semillas. La ausencia de fenotipo obtenida con las formas transcripcionalmente inactivas (M1 y M2), indicaría una redundancia en el control por HSFs del programa genético activado por HaHSFA9; es decir, la participación adicional de otros HSFs similares a HaHSFA9 (de Clase A). Por interacción de doble híbrido en levaduras (utilizando como cebo una versión de HaHSFA9), hemos clonado otro HSF de Clase A, concretamente HaHSFA4. Ambos factores interaccionan físicamente (demostrado in vitro por GST‑pull down, e in vivo por BiFC). También lo hacen funcionalmente en la activación transcripcional sinérgica de promotores de genes sHSP específicos, tanto en hojas como en embriones de girasol. Estos resultados sugieren que HaHSFA4 podría ser un co‑activador del programa genético controlado por HaHSFA9

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