Almacenamiento en frío de espermatozoides de trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss): Efectos en la motilidad, superóxido intracelular, integridad de la membrana plasmática y potencial de membrana mitocondrial

In teleostei, as opposed to what happens in mammals, most of the studies that evaluate the quality storages of semen are oriented toward the exposure of spermatozoa to some reactive oxygen species (ROS), the utilization of antioxidants in the diet, or the incorporation of these in seminal plasma. There is no available the literature covering the presence of superoxide ions (O 2.-), or the function of these on the interior of the spermatozoa that have been stored. In this study, we evaluated the effect of storage on intracellular O2.-, motility, plasmatic membrane integrity, and mitochondrial membrane potential (ΔΨMit) of spermatozoa of rainbow trout (oncorhynchus mykiss). Semen was extracted and put into storage for 12 days at 4 °C. Spermatozoa motility, (ΔΨMit), plasmatic membrane integrity were evaluated every 4 days, and intracellular O2. was detected. It was found that 82.59% of the cells were positive for the staining of O2. on the day of sample extraction, while sperm motility, ΔΨMit and plasmatic membrane integrity only showed deterioration after the eighth day of storage. Only ΔΨ Mit is correlated negatively with O2. starting from the eighth day of storage (r = -0.56 P < 0.05). Regarding motility and plasmatic membrane integrity, these were not affected by intracellular O2., although the deterioration observed in these last two indicators, could have been caused by the prolonged contact of the spermatozoa with contaminating agents that were not evaluated in this study.

A diferencia de lo que ocurre en mamíferos, en teleósteos la mayoría de los estudios que evalúan la calidad del semen almacenado están orientados a la exposición de los espermatozoides a algunas especies reactivas de oxígeno (ROS), a la incorporación de antioxidantes en la dieta o a la aplicación de éstos en el plasma seminal. No se encuentran trabajos disponibles que traten la presencia del radical superóxido (O2._), ni la función que éste cumple al interior del espermatozoide cuando se encuentran almacenados. En la presente investigación se evaluó el efecto del almacenamiento en el O2._, motilidad, integridad de la membrana plasmática y potencial de membrana mitocondrial (ΔΨMit) en espermatozoides de trucha arcoiris (oncorhynchus mykiss). Para ello se extrajo el semen, el cual fue almacenado durante 12 días a 4 ºC. Cada 4 días se evaluó motilidad, ΔΨMit, integridad de la membrana plasmática y se detectó O2._ intracelular en los espermatozoides. Se encontró un 82,59% de células con tinción positiva para O2._ el día de extracción de la muestra, mientras que la motilidad, ΔΨMit y la integridad de la membrana plasmática, solo mostraron deterioro después del octavo día de almacenamiento. Únicamente el ΔΨMit se correlaciona negativamente con O2._ a partir del octavo día de almacenamiento (r = -0,56 P < 0,05). Respecto a la motilidad e integridad de la membrana plasmática no fueron afectadas por el O2._ intracelular, no obstante el deterioro observado en estos dos últimos indicadores podría deberse al contacto prolongado de los espermatozoides con agentes contaminantes no evaluados en el presente trabajo.