Avaliação do efeito de um coquetel de bacteriófagos e uma peptideoglicano-hidrolase associada a virion sobre biofilme de bactérias redutoras de sulfato | Evaluation of the effect of a bacteriophage cocktail and a virus-associated peptidoglycan hydrolase on the biofilm of sulfate-reducing bacteria

O biofilme consiste em um dos grandes associado a indústria de petrolífera, devido à dificuldade na remoção completa dos microrganismos inseridos na matriz. O biofilme formado por BRS é o responsável pelo aumento da concentração de metabólitos corrosivos no interior das instalações metálicas e diferentes abordagens são almejados para mitigar este problema. Os bacteriófagos e suas proteínas líticas, como peptideoglicano-hidrolases associadas a vírions (VAPGH), têm se mostrado uma alternativa para eliminação de microrganismos devido à sua especificidade. No primeiro capítulo deste trabalho foi avaliado o potencial de um coquetel, composto por seis bacteriófagos, na prevenção da formação e remoção do biofilme de culturas mistas de bactérias redutoras de sulfato, isoladas da indústria petrolífera. Foi observado que o coquetel de bacteriófagos proposto preveniu parcialmente a formação do biofilme pela cultura P55(água de injeção]) e P48SEP (separador de produção), e impediu a formação do mesmo para as culturas P48SEP, P55 e P37 (tangue Slop). Ademais, no segundo capítulo foi avaliada a atividade muralítica de uma putativa VAPGH, codificada pelo bacteriófago vB_EcoM-UFV13 e expressa de forma heteróloga, em um sistema procarioto, sobre a formação de biofilme por Escherichia coli. A VAPGH 246 foi expressa a partir da indução com 0,5 mM IPTG e purificada por cromatografia de afinidade. Foi observada a redução significativa do biofilme de E. coli após 24h de tratamento. A presença da enzima, mesmo em baixas concentrações, mostrou ser mais efetivo que o tratamento com o bacteriófago vB_EcoM-UFV13. Desse modo demonstrando o potencial biotecnológico da aplicação de coquetéis fágicos multiespecíficos, assim como potencial das VAPGHs na eliminação e prevenção da formação de biofilmes de diferentes microrganismos. Palavras-chave: Bacteriófagos. VAPGH. Biofilme. Bactérias Redutoras de Sulfato

Biofilm is one of the great ones associated with the oil industry, due to the difficulty of completely removing the microorganisms inserted in the matrix. The biofilm formed by BRS is responsible for the increase in the concentration of corrosive metabolites inside metallic installations and different approaches are aimed at mitigating this problem. Bacteriophages and their lytic proteins, such as peptidoglycan hydrolases associated with virions (VAPGH), are an alternative for eliminating microorganisms due to their specificity. In the first chapter of this work, the potential of a cocktail, composed of six bacteriophages, in preventing the formation and removal of biofilm of mixed cultures of sulfate-reducing bacteria, leaders in the oil industry, was evaluated. It was observed that the proposed bacteriophage cocktail partially prevented the formation of biofilm by the P55 (injection water) and P48SEP (production separator) cultures, and prevented the formation of the same for the P48SEP, P55 and P37 cultures (Slop tango). Furthermore, in the second chapter, the muralitic activity of a VAPGH putative, encoded by the bacteriophage vB_EcoM-UFV13 and expressed heterologously, in a prokaryotic system, on biofilm formation by Escherichia coli was evaluated. VAPGH 246 was expressed from induction with 0.5 mM IPTG and purified by affinity chromatography. Was observed a decrease in the E. coli biofilm after 24h of treatment. The presence of the enzyme, even in low drops, is more effective than treatment with the bacteriophage vB_EcoM-UFV13. Thus, demonstrating the biotechnological potential of the application of multispecific phage cocktails, as well as the potential of VAPGHs on biofilms of different microorganisms. Keywords: Bacteriophages. VAPGH. Biofilm. Sulphate-reducing bacteria

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