Efecto del medio extensor y de las curvas de enfriamiento y congelamiento en la célula espermática equina en caballos de la sabana de Bogotá

Este trabajo tiene como objetivo evaluar el efecto de dos crioprotectores en el medio de congelación INRA 82 modificado con azúcares, asociados a las curvas de enfriamiento y congelamiento sobre la célula espermática de caballos criollos colombianos. Un eyaculado de seis caballos fue utilizado para evaluar los parámetros de motilidad, vigor, morfología e integridad de membrana plasmática; cada eyaculado se dividió en dos alícuotas iguales al azar con variaciones en la adición del crioprotector (DMF 5% o Glicerol 5%) y se congelo siguiendo el mismo protocolo de criopreservación, con una curva de enfriamiento de 5ºC durante 120 minutos y exposición a vapores de nitrógeno durante 15 minutos antes de ser sumergido al nitrógeno líquido. La supervivencia espermática se evalúo estimando la motilidad total, progresiva y el vigor espermático mediante el test de termorresistencia, la morfología de las células se evalúo usando tinción de eosina negrosina y la integridad de la membrana plasmática mediante el test hiposmótico. Al evaluar el semen pos descongelación no se observó diferencia significativa (p> 0.05) entre los dos crioprotectores respecto a los parámetros evaluados. Los resultados nos permiten concluir que la utilización de un medio INRA 82 modificado con azúcares que mejoran la fuente energética y la crioprotección extracelular asociado a leche descremada con 2% de yema de huevo y a una curva de enfriamiento moderada de 120 minutos a 5ºC muestran efectos benéficos en los parámetros espermáticos en el periodo pos descongelamiento de forma independiente al crioprotector utilizado en los caballos criollos colombianos.

This study aims to assess the effect of two cryoprotectants in the freezing INRA 82 medium modified with sugars associated with the curves of cooling and freezing of the sperm cell of Colombian criollo horses. A six-horse ejaculate was used to assess motility, vigor, morphology and plasma membrane integrity, each ejaculate was divided in two equal aliquots with varying random addition of cryoprotectant (5% DMF or glycerol 5%) frozen in the same cryopreservation protocol, with a cooling curve of 5 ° C for 120 minutes and exposure to nitrogen vapor for 15 minutes before being submerged by liquid nitrogen. Sperm survival was assessed by estimating the total motility, progressive sperm and vigor through the test of heat resistance, cell morphology was evaluated using negrosina eosin staining and the integrity of the plasma membrane by hyposmotic test. In assessing of the post-thaw semen there was no significant difference (p> 0.05) between the two cryoprotectants respect to the parameters. The results allow us to conclude that the use of INRA 82 modified with sugars that enhance the energy source and cryoprotection extracellular associated with skim milk with 2% egg yolk and a moderate cooling curve for 120 minutes at 5 ° C, shows beneficial effects in sperm parameters in the post-thaw semen independently of the cryoprotectant used in Colombian criollo horses.

Medicina Veterinaria