Determination and evaluation of the best conditions for the production of a vaccine against Clostridium chauvoei | Determinación y evaluación de las condiciones óptimas para la producción de una vacuna contra Clostridium chauvoei

Clostridium chauvoei is responsible for a number of diseases such as symptomatic coal (blackleg) and malignant oedema in cattle, sheep and many other domestic and wild animals. Vaccines for the control of this and other livestock diseases caused by various species of clostridia are widely used. For vaccine production it is desirable that high cellular density cultures with high immunogenic power are obtained, mainly because immunity to Clostridium chauvoei is generally considered to be antibacterial rather than antitoxic. Consequently, culture conditions have to be adequately monitored and controlled. The aim of this work was to optimise the production of a vaccine against Clostridium chauvoei based on strains IRP-434, IRP 206, ATCC 10092, ATCC 11957 and LANIP, used by “Empresa Colombiana de Productos Veterinarios”, VECOL, S.A., to determine the culture medium that allows the highest cellular density. Results show that modified clostridium medium allows the highest cellular density production with average values of 31,5X108 cell/ml for the stock IRP 434 and 31,8X108 cell/ml for the stock IRP 206. Once defined the modified clostridium medium, the stock IRP 434,IRP 206 and growth time as the most suitable for optimal biomass production ( 16 – 48 hours), the lethal activity of the stock (LD50 = 106.6 , 106.8) was determined, the immunogenicity was evaluated through a potency test carried out in guinea-pigs. The presence of the flagellar protein was confirmed through the SDS-PAGE electrophoresis technique.

El Clostridium chauvoei es responsable de enfermedades como carbón sintomático (pierna negra) y edema maligno en ganado vacuno, ovino y en muchos otros animales domésticos y silvestres. Vacunas para el control de ésta y otras enfermedades del ganado causadas por varias especies de Clostridium, son ampliamente usadas. Para la producción de la vacuna es conveniente que cultivos con alta densidad celular y con un alto poder inmunogénico sean obtenidos, principalmente porque la inmunidad de Clostridium chauvoei es generalmente considerada como antibacterial más que antitóxica. Por consiguiente las condiciones del cultivo tienen que ser supervisadas y controladas adecuadamente. El objetivo de este estudio fue optimizar la producción de una vacuna contra Clostridium chauvoei por las cepas IRP-434,IRP 206, ATCC 10092, ATCC 11957 y LANIP empleadas en la Empresa Colombiana de Productos Veterinarios, VECOL S.A., determinando el mejor medio de cultivo que permitiera la mayor producción de biomasa. En este sentido, el medio de cultivo, Clostridium Modificado, favoreció la máxima producción de biomasa con valores promedio de 31,5X108 células/ml para la cepa IRP 434 y 31,8X108 células/ml para la cepa IRP 206. Una vez seleccionado el medio Clostridium Modificado, las cepas IRP 206 e IRP 434 y el tiempo de incubación para la óptima producción de masa celular (16 - 48 horas), se procedió a determinar las actividades letales de las cepas y por último se confirmó su inmunogenicidad a través de la prueba de potencia realizada en cobayos. La presencia de la proteína flagelar se confirmó a través de la técnica de electroforesis SDS-PAGE en geles de poliacrilamida.