Synthesis of bovine leukemia virus antigens in Escherichia coli
1990
Ulrich, R. | Siakkou, H. | Platzer, C. | Bossmann, H. | Moehring, R. | Wiedmann, M. | Baehring, S. | Rosenthal, S. (Central Institute of Molecular Biology, Berlin-Buch (Germany, F.R.))
German. Durch Einsatz von pEX-Vektoren wurden Plasmide konstruiert, welche die folgenden Bestandteile des Rinderleukaemie-Virus (rLV) kodieren und exprimieren: Hauptstrukturprotein p24, nukleinsaeurebindendes Protein p12, Transmembranprotein gp30, ferner verschiedene Segmente des Huellproteins gp51. In Coomassieblau-gefaerbten Gelen sowie in der "Western blot"-Analyse mit Anti-RLV-Seren des Kaninchens gelang bei saemtlichen rekombinanten Plasmiden der Nachweis der Expression von Fusionsproteinen mit Molekulargewichten ueber 117 kD. Die Kopplung eines gp51-kodierenden DNA-Fragments an ein p24-kodierendes DNA-Fragment in pEX-Vektoren fuehrte zur Synthese eines Fusionsproteins, das mit Hilfe von monoklonalen Antikoerpern gegen gp51- und p24-Epitope erkannt wurde. Mit Hilfe seines anderen Vektors wurde ein gp51-kodierendes DNA-Fragment des RLV als Fusionsprotein mit 100 Aminosaeuren der MS2-Polymerase zur Expression gebracht. Das Fusionsprotein wurde von monoklonalen Antikoerpern gegen gp51 erkannt
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