Purification and characterization of proteases and lipases produced by Pseudomonas fluorescens in milk at 4 C degrees | Purificacion y caracterizacion de proteasas y lipasas producidas por pseudomonas fluorescens en leche A 4 grados C
1997
Costa L, Marcia | Herrera C, Viviana | Romero M, Alejandro | Carrasco R, Erwin (Universidad Austral de Chile, Valdivia (Chile). Inst. de Ciencia y Tecnologia de los Alimentos)
Spanish; Castilian. Se determino la cinetica de produccion de proteasas y crecimiento de la cepa RV 10 de Pseudomonas fluorescens. Las cepas fueron cultivadas en leche, entera durante 40 h a 40C. Se observo un considerable crecimiento celular, como tambien un aumento sostenido de las actividades enzimaticas, proteasica y lipasica, a partir las 20 h, en plena fase de crecimiento exponencial. Extractos enzimaticos crudos fueron purificados a traves de centrifugacion, incubacion con lisozima y sonicacion, ultrafiltracion y cromatografia de exclusion molecular. Se obtuvieron tres fracciones enzimaticas, dos con actividad proteasica y una con actividad lipasica, sometiendose cada fraccion a ensayos de termorresistencia y a electroforesis en gel de poliacrilamida para la determinacion de los pesos moleculares. Se encontro que las tres fracciones mostraron marcada termorresistencia entre los 90 y 120'C. Las fracciones proteasicas tenian pesos moleculares de aproximadamente 38,9 kD y 33,1 kD, siendo denominadas proteasas 1 y 11, respectivamente. La fraccion con actividad lipasica tenia un peso molecular de aproximadamente 20,9 kD
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