Evaluation of humoral and cellular immune response evaluation against Brucella abortus strain RB51 antigens in bovine | Medicion de respuesta inmune humoral y celular frente a antigenos de Brucella abortus RB51 en bovinos

Spanish; Castilian. Con el objeto de evaluar comparativamente el tipo de respuesta inmune inducido por los antigenos estructurales purificados y vacunas vivas de Brucella abortus, 14 bovinos criollos hembras de 19 meses de edad fueron distribuidos al azar, en cinco grupos experimentales e inmunizados via subcutanea de la siguiente manera: OMP-II (proteinas de membrana externa), OMP-II-Cadena-O. OMP II acoplado a polisacarido-O, B. abortus cepa RB51, B. abortus cepa 19 (C19) y solucion salina para el grupo control. Dos meses posinmunizacion, los animales fueron desafiados. via intramuscular, con cepa patogena de referencia B. abotus 2308 Y evaluados en su nivel de proteccion 30 dias posdesafio. La respuesta inmune humoral especifica fue determinada mediante las pruebas convencionales, de aglutitinacion Rosa de Bengala, fijacion de complemento, inmunodifusion radial. ELISA indirecta. a los 8. 15, 30, 60 y 90 dias posinmunizacion. Adicionalmente se determino la subclase (IgG por ELISA tipo doble sandwich. La evaluacion de respuesta celular fue determinada mediante linfoproliferacion, expresada en indices de estimulacion (IS), obtenidos por los niveles de incorporacion de 3H timidina, medicion de Interferon gamma (IFN-y), igualmente expresado como IS y cuantificacion de subpoblaciones linfoides CD4+ y CD8+ por citofluorometria. Animales vacunados con cepas vivas demostraron proteccion total al reto, mientras se observo Lin 66% de proteccion en los vacunados con antigenos purificados. Se observo ausencia de anticuerpos a lipopolisacarido, sLPS, excepto el vacunado con cepa 19, confirmando la ventaja diagnostica de la utilizacion de la cepa RB51 o sus antigenos purificados. La linfoproliferacion como una de las medidas de respuesta celular no demostro IS significativos (p0.05) frente a los antigenos estructurales purificados, OMP-II, Cadena-O y sLPS en ninguno de los grupos experimentales. IS superiores se encontraron al emplear antigeno soluble crudo de B. abortus RB51, los que evidenciaron diferencias significativas (p0.05) a favor de los grupos vacunados con los antigenos replicantes. Con respecto a los grupos experimentales se confirmaron niveles de produccion de IFN-y mas altos en los grupos vacunados con cepas, vivas, especialmente en el grupo cepa 19. Al analizar la relacion CD4/CD8, esta se mantuvo estable durante todo el tiempo de observacion y no se detecto predominio ni disminucion de ninguna subpoblacion linfoide. Los resultados permiten concluir que la cepa B. abortus RB51 induce igual nivel de proteccion al de la cepa de vacuna tradicional C19, superando la limitante en diagnostico diferenciar. Los antigenos purificados de membrana externa, OMP-II y OMP-II-Cadena 0, aunque presentan un nivel inferior de proteccion en los parametros inmunologicos medidos en este estudio, en general. se comportan en forma semejante ante a las cepas vivas, indicando que son antigenicos e inducen una memoria de corta duracion probablemente necesitando administracion de dosis repetidas para alcanzar niveles eficientes de proteccion. Se plantea que la proteccion observada en los animales vacunados con B. abortus RB51 ante desafio patogeno es el resultado de la estimulacion de linfocitos T CD4+ Th1 y linfocitos T CD8+ ante la presentacion de peptidos de proteinas de membrana externa