Short communication. Sequence of msp1alpha gene of Anaplasma marginale Havana isolate and expression in eukaryotic cells

Spanish; Castilian. La anaplasmosis bovina es una enfermedad causada por la rickettsia Anaplasma marginale que afecta al ganado bovino. Las principales proteínas de la superficie codificadas por genes con secuencias conservadas constituyen candidatos potenciales para vacunas. Dentro de estas proteínas, MSP1a es expresada por un gen de copia simple (msp1alfa). El peso molecular de MSP1a varía entre aislados de A. marginale de diferentes regiones geográficas, debido a la presencia, en número variable, de una secuencia de 28-29 aminoácidos repetida en tándem. En el presente estudio se secuenció el gen msp1alfa del aislado Habana de A. marginale, de 2.043 kb, demostrando la presencia de cinco regiones repetidas en tándem. Se clonó este gen en un vector de expresión eucariota (pCIneo), se transfectó en células COS-7 y se verificó la expresión de la proteína MSP1a por inmunofluorescencia, demostrándose la expresión de este gen procariota en células eucariotas. Estos datos proporcionan las bases para la utilización de este gen en futuras estrategias de inmunizaciones de DNA conteniendo uno o varios genes que codifican para proteínas principales de superficie de A. marginale.

English. Bovine anaplasmosis is a disease of worldwide economic importance caused by the rickettsia Anaplasma marginale. Several major surface proteins with conserved gene sequences have been examined as potential candidates for vaccines. One of these proteins, MSP1a, is expressed from the single copy msp1alpha gene. The molecular weight of MSP1a varies among the geographic isolates of A. marginale because of a varying number of tandem repeated peptides of 28-29 amino acids. In the present study, the sequence of the msp1alpha gene of Anaplasma marginale Havana isolate was determined, with a size of 2,043 kb, demonstrating the presence of five tandem repeated regions. This gene was cloned into the eukaryotic expression vector pCIneo, transfected in COS-7 cells and expression verified by immunofluorescence. These data provide a basis for an immunization strategy using the msp1alpha gene in DNA immunization containing single or multiple genes encoding major surface proteins of A. marginale.