Obtención y evaluación de un antisuero policlonal específico de Leiftonia xyli subsp. xyli.

Spanish; Castilian. El raquitismo de los retoños (RRCA o RSD como también se conoce), constituye una de las enfermedades más importantes de la caña de azúcar. En Cuba ha afectado en gran medida, por lo que las pérdidas se estiman en un 20%. El diagnóstico de esta entidad resulta indispensable para la evaluación de los donantes que se utilizan en el programa nacional de obtención de semilla categorizada, así como para otras investigaciones biotecnológicas que se ejecutan en el país. El objetivo de este trabajo ha sido la obtención y evaluación de un antisuero policlonal específico al utilizar como inmunógeno, la suspensión bacteriana obtenida por cultivo in vitro de jugo de cañas enfermas, en medio selectivo modificado. Dicho antisuero se produce por primera vez en nuestro país y ha resultado ser específico al obtenerse títulos de 1: 40000, mediante la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) y 1:4000 mediante dot blot, lo que permitirá el desarrollo de otras técnicas serológicas que demandan mayor especificidad y sensibilidad en las determinaciones. Se purificaron además las inmunoglobulinas del suero y se evaluaron por ambas técnicas, así como por la técnica de aglutinación en látex donde se obtuvieron reacciones características entre los 5 y 10 minutos al emplear el látex sensibilizado con las inmunoglobulinas en el rango 1:200- 1:800. Estos estudios preliminares demuestran que dicha técnica puede ser utilizada con fines diagnósticos para el caso de esta entidad.

English. Ratoon stunting disease (RSD) is one of the major sugarcane disease and it is wide distributed in Cuba. RSD diagnosis is very important in order to evaluate the donors that are used in the National Program of Certified Seed of Sugarcane and for other biotechnological researches done in our country. The aim of this work has been the obtainment and evaluation of a specific policlonal antiserum using as the inmunogen, the bacterial suspension obtained by pure culture in vitro from infected sugarcane juices in modified culture media. The antiserum was obtained for the first time in Cuba and it will allow to develop other serological techniques that require better sensibility and specificity. It was titrated by indirect inmunofluorescence (1: 40000) and Dot blot (1: 4000) and its specificity was determined. The purified inmunoglobulins of serum were also evaluated and the latex agglutination technique was carried out. A specific agglutination reaction was observed in the range of 1: 200-1: 800 at 5-10 minutes. These results demonstrate that the use of latex floculation in diagnosis of L. xyli subsp. xyli may be useful.