Contenido de ADN en aislamientos de Ustilago scitaminea Sydow estimado por citometría de flujo.
2001
Rodríguez, E., Instituto Nacional de Investigaciones de la Caña de Azúcar | Acevedo, R., Instituto Nacional de Investigaciones de la Caña de Azúcar | La O, M., Instituto Nacional de Investigaciones de la Caña de Azúcar
Spanish; Castilian. La citometría de flujo es una herramienta poderosa para medir de forma rápida gran número de partículas o células, ella brinda información sobre varios parámetros como talla, forma y contenido relativo de ADN. Se ensayaron diferentes métodos de fijación, lavado y tinción para la preparación de las esporas de siete aislamientos de Ustilago scitaminea Sydow, agente causal del carbón de la caña de azúcar, con vistas a determinar, mediante citometría de flujo, el contenido relativo de ADN y conocer si existen diferencias entre ellos. Se estableció la técnica, utilizando fijación con etanol al 70%, lavado con tritón X-100 al 2% y como agente cromógeno el ioduro de propidio. El contenido de ADN fue diferente entre los aislamientos y con relación al patrón de eritrocitos de trucha (Salmo trutta L.); en todos los casos la distribución del contenido de ADN se correspondió con el canal 162.8 para dichos eritrocitos. Se demostró que la citometría de flujo puede utilizarse en los estudios de caracterización de aislamientos de U. scitaminea para la posible diferenciación de razas de este microorganismo.
Show more [+] Less [-]English. Flow cytometry is a powerful tool to measure quickly large numbers of particles and cells. If offers information about several cell parameters like: size, shape and relative DNA content. Several methods of fixation, washing and colouring were assayed for the preparation of spores of seven isolates of Ustilago scitaminea Sydow, causal agent of sugarcane smut disease. This was carried out in order to determine the relative DNA content by flow cytometry and to know if there are differences among them. The technique was established by using fixation in 70% ethanol, washing with 2% triton X-100 and propidium iodide as cromogenic agent. DNA content was different among isolates and regarding the erythrocyte pattern of thout (Salmo trutta L.). In all cases, the distribution of DNA content agreed with channel 162.8 for such erythrocytes. Flow cytometry proved to be potentially useful in the characterization of U. scitaminea isolates for the possible differentiation of races of this microorganism.
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