Angiogenic activity of swine granulosa cells: effects of hypoxia and role of VEGF [Vascular Endothelial Growth Factor]

English. The present research was undertaken to investigate the modulatory effects of hypoxia on the angiogenic activity of swine granulosa cells cultured in vitro. To do this, we employed an angiogenesis bioassay consisting of porcine Aortic Endothelial Cells (AOC) cultured in a three dimensional fibrin gel, in presence or absence of a VEGF inhibitor (VEGF Trap R1R2). AOC were treated for 192 h with media conditioned by granulosa cells, maintained under normoxic (19% O2), partial (5% O2) or total (1% O2) hypoxic conditions. AOC proliferation was enhanced (P0.01) only by media conditioned in partial and total hypoxia and the treatment with VEGF Trap R1R2 completely abolished this effect. As a whole, these data suggest that oxygen restriction, which gradually establishes during follicular growth, plays a crucial role in driving ovarian angiogenesis via VEGF production by granulosa cells

Italian. [La presente ricerca è stata intrapresa per studiare gli effetti regolatori dell'ipossia sull'attività angiogenetica delle cellule della granulosa suina coltivate in vitro. A tale fine, abbiamo utilizzato un modello angiogenetico in vitro consistente in cellule endoteliali aortiche (AOC) di suino coltivate in un gel tridimensionale di fibrina, in presenza o assenza di un inibitore del VEGF (VEGF Trap R1R2). Le AOC sono state trattate per 192 h con un substrato di coltura condizionato dalle cellule della granulosa, mantenute in condizioni normossiche (19% O2), ipossiche parziali (5% O2) o totali (1% O2). La proliferazione delle AOC era incrementata (P0,01) solo dai substrati condizionati in ipossia parziale e totale e il trattamento con VGEF Trap R1R2 sopprimeva completamente questo effetto. In complesso, questi dati fanno ritenere che la restrizione della disponibilità di ossigeno, che si instaura gradualmente durante la crescita follicolare, giochi un ruolo cruciale nello sviluppo di una estesa rete microvascolare associata alla crescita del follicolo per mezzo della produzione di VEGF da parte delle cellule della granulosa.]