Flow cytometric analysis of in vitro activation on differently dense subpopulations of bovine PMNs [neutrophil granulocytes]
2004
Sartorelli, P. | Comazzi, S. | Giordano, A. | Spagnolo, V.
English. Blood samples from healthy cattle were divided in two aliquots, one of which was submitted to in vitro activation with LPS for 2 hours. After incubation, neutrophils (PMNs) were separated on a discontinuous Percoll gradient (50% and 70%). Blood samples and isolated subpopulations were submitted to flow cytometric evaluation. Mean forward scatter (FSC) and mean fluorescence intensity (MFI) of CD11b were compared in activated and control samples and in isolated populations. Results showed an increase of both FSC and MFI after activation only on whole blood. After activation, most of PMNs were recovered in the upper layer of Percoll (50% and 70%). This suggests to perform functional tests on whole blood in bovine affected by inflammatory diseases, in which the decreased density of PMNs could be responsible for the lack of differences in functional tests performed on cells isolated by routinary techniques
Show more [+] Less [-]Italian. [Campioni di sangue di bovine sane sono stati divisi in due aliquote, una delle quali è stata sottoposta ad attivazione in vitro con LPS per 2 ore. Dopo l'incubazione, i neutrofili (PMN) sono stati separati su un gradiente discontinuo di Percoll (50% e 70%). I campioni di sangue e le popolazioni isolate sono stati sottoposti a valutazione mediante citofluorimetria di flusso. Il forward scatter (FSC) medio e l'intensità media di fluorescenza (MFI) della CD11b sono stati confrontati in campioni attivati e di controllo e in popolazioni isolate. I risultati hanno messo in luce un aumento sia del FSC, sia della MFI dopo attivazione solo sul sangue intero. Dopo l'attivazione, la maggior parte dei PMN è stata riscontrata al di sopra dello strato di Percoll (50% e 70%). Questo dato suggerisce di effettuare test funzionali sul sangue intero nelle bovine affette da malattie infiammatorie, in cui la diminuzione della densità di PMN potrebbe essere responsabile della mancanza di differenze riscontrate in test funzionali effettuati su cellule isolate mediante tecniche di routine.]
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