Use of the immunomagnetic separation technique and polymerase chain reaction for detection of verocytotoxin-producing Eschrichia coli in cattle at slaughter
2004
Bonardi, S. | Bacci, C. | Pizzin, G. | Orlandini, B. | Donati, E. | Brindani, F. | Foni, E. | Chiapponi, C. | Aibino, E.
English. A total of 105 samples of bovine origin (63 intestinal content and 42 tonsil samples) were analysed for VTEC O157 and non-O157 VTEC using (i) immunomagnetic separation (IMS) beads coated with antibodies to O157, O26, O103, O111 and O145 antigens, slide agglutination (SA) tests and multiplex PCR for the detection of vt1, vt2, eae, hly genes and (ii) multiplex PCR for the same sequences directly from the enrichment cultures. IMS-SA-PCR tests detected 2 isolates of VTEC, respectively serogroups O157 and O26 from the caecal content of slaughtered cattle. Prevalence of VTEC was 3.2% (2/63). Tonsils were negative for VTEC. Using the PCR directly from the enrichment broths, 3 faecal samples (4.8%) and 4 tonsils (4/42; 9.5%) were positive for VTEC virulence genes
Show more [+] Less [-]Italian. [E' stato analizzato un totale di 105 campioni di origine bovina (63 di contenuto intestinale e 42 di tonsille) in relazione alla presenza di VTEC O157 e VETEC non O157, utilizzando (i) supporti di immuno-separazione magnetica (IMS) rivestiti con anticorpi verso gli antigeni O157, O26, O103, O111 e O145, test di agglutinazione su vetrino (SA) e PCR multiplex per l'individuazione dei geni vt1, vt2, eae, hly e (ii) PCR multiplex per le medesime sequenze direttamente dalle colture di arricchimento. I test IMS-SA-PCR hanno consentito di individuare due isolati di VTEC, rispettivamente sierogruppo O157 e O26, dal contenuto cecale del bovini macellati. La prevalenza dei VTEC era pari al 3,2% (2/63). Le tonsille erano negative per i VTEC. Utilizzando la PCR direttamente dai brodi di arricchimento, 3 campioni fecali (4,8%) e 4 di tonsille (4/42; 9,5%) sono risultati positivi per geni di virulenza di VTEC.]
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