Transformación de embriones somáticos de mango por biobalística
2004
Chavarri, M., Universidad Central de Venezuela, Maracay (Venezuela). Facultad de Agronomía | Vegas, A., Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Maracay (Venezuela). Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias | Zambrano, A.Y., Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Maracay (Venezuela). Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias | Demey, J.R., Fundación Instituo de Estudios Avanzados, Maracay (Venezuela)
Spanish; Castilian. Con la finalidad de transformar genéticamente mango mediante biobalística, se bombardearon embriones, somáticos de las variedades Haden, Madame Francis y Kent. Se determinó la dosis máxima de PPT en que los embriones somáticos sobreviven, cultivándolos en el medio Gamborg, Miller y Ojima en concentraciones de =0,51 y 2mg/l de PPT durante 3 meses y subcultivando mensualmente para evaluar peso fresco y seco. Los embriones somáticos fueron bombardeados con el plásmido CAMBIA 3201 que contiene los genes GUS y BAR, con dos tamaños de partículas de tungsteno (0,7 y 1,3µm), presión de 80psi, dos distancias de bombardeo (10,0 y 16,5cm) y 5µg de ADN. Se seleccionaron los embriones transformados en medio Gamborg, Miller y Ojima con 0,5mg/l de PPT. Las condiciones de bombardeo escogidas fueron el tamaño de partícula de 0,7 µm y la distancia de bombardeo de 16,5cm. Después de tres meses de selección en las concentraciones de PPT utilizadas se hizo evidente la sobre vivencia de los embriones transformados en la variedad Kent, mientras que los embriones no transformados sobrevivieron en concentración de 0,5mg/l. Las variedades Haden y Madame Francis fueron sensibles a las condiciones de bombardeo y selección suministrados, muriendo después de este proceso. Se logró una sobre vivencia de 4% y la regeneración de 3 clones por 0,5g de tejido bombardeado. Se evidenció la actividad enzimática de la expresión transitoria del gen GUS pero no la estable y la incorporación de los genes GUS y BAR mediante PCR.
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