Diversidad genética de especies silvestres del género Nicotiana II: caracterización molecular mediante marcadores RAPD

Spanish; Castilian. Las especies silvestres del género Nicotiana son reservorios de genes de resistencia a plagas, así como para rasgos cualitativos y fitoquímicos importantes, los cuales no están presentes en las variedades cultivadas. El objetivo de trabajo fue caracterizar la variabilidad genética de 10 especies silvestres del género Nicotiana mediante el uso de marcadores RAPD (Fragmentos Polimórficos de ADN Amplificados al Azar). De los diez cebadores usados en el ensayo RAPD, cuatro de ellos produjeron productos de amplificación que resultaron apenas visibles para ser evaluados o no fueron consistentemente reproducibles y seis cebadores produjeron un total de 117 bandas, 100 por ciento polimórficas. Todas las bandas se evaluaron para la comparación de la amplificación, para un promedio de 19,5 bandas por cebador. El mayor nivel de polimorfismo entre las especies se observó en Nicotiana velutina Wheelen y Nicotiana glutinosa L. con 35,89 por ciento y 32,47 por ciento respectivamente, ambas del subgénero Petunioides. En contraste, el menor porcentaje de polimorfismo se observó en la especie Nicotiana knightiana Goodsp (18,80 por ciento), perteneciente al subgénero Rustica. El patrón obtenido en el dendrograma coincide con la clasificación tradicional de las especies del género Nicotiana. En nueve, de las 10 especies silvestres del género Nicotiana evaluadas, todos los cebadores generaron al menos dos bandas específicas. El total de los 32 marcadores específicos de cada especie encontrados en el presente estudio podría resultar de gran utilidad en los programas de mejoramiento genético.

English. Wild Nicotiana species are reservoir of genes for several pests, besides other genes for important phytochemical and quality traits, which are not present in cultivated varieties. The application of Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) analysis to determine the degree of genetic variation among ten wild Nicotiana species is herein presented. Four of the ten primers used in RAPD analysis, produced amplification products that were too faint to score or could not be consistently reproduced and six primers yielded a total of 117 bands, all of them polymorphic. All the bands were scored from the comparison of amplification, with an average of 19.5 bands scored per primer. The highest level of polymorphism among the species was observed for Nicotiana velutina Wheelen and Nicotiana glutinosa L., with 35.89 percent and 32.47 percent respectively, both from subgenus Petunioides. In contrast, the lowest level of polymorphism (18,80 percent) was observed for Nicotiana knightiana Goodsp, subgenus Rustica. The clustering pattern matched with the traditional classification of Nicotiana species. In nine of the ten wild Nicotiana species evaluated, all the primers generated at least two specifics bands. The total of the 32 species-specific markers identified in the present study will be useful in the genetic breeding programs.