Development and application of inderect competitive enzyme immunoassay | Разработка и использование непрямого конкурентного иммуноферментного анализа для определения неомицина в молоке

English. Neomycin is an antibiotic which in residual quantities can be present in food products and provoke forming the resistance of microorganisms to this preparation. In the EC countries the maximum allowable level of the content of neomycin in milk is 1500 microgram/kg. In the RF there was not rating, but the recommended level should not be higher than 500 microgram/kg. Polyclonal antibodies to perform an indirect competitive enzyme-link immunosorbent assay were produced by immunizing rabbits with neomycin B conjugated with transferin oxidation. Some systems have been developed to determine an amount of antibiotics in milk with detection limitations of 1.0, 0.1 and 0.01 ng/ml. The degree of extraction in analyzing milk having a fat content 1.5-10% was 84.0-125.2%, on average 111.7%. The developed method was used to analyze 106 milk samples. The concentration of neomycin higher than 100 ng/ml was discovered in 57 of them, higher than 500 ng/ml in 11, higher than 1500 ng/ml in 1. Neomycin even in the least sensitive assay variant was discovered in milk without special sample preparation with 100-hold dilution

Russian. Неомицин (НМ) – антибиотик, который в остаточных количествах может содержаться в продуктах питания и провоцировать формирование резистентности микроорганизмов к этому препарату. В странах ЕС максимально допустимый уровень содержания НМ в молоке составляет 1500 мкг/кг. В РФ нормирование не проведено, но рекомендуемый уровень не должен превышать 500 мкг/кг. Поликлональные антитела для проведения непрямого конкурентного твердофазного иммуноферментного анализа были получены путем иммунизации кроликов неомицином В, конъюгированным с окислением трансферином. Разработаны системы для количественного определения антибиотиков в молоке с пределами определения 1,0; 0,1 и 0,01 нг/мл. Степень извлечения при анализе молока жирностью 1,5-10% составила 84,0-125,2%, в среднем 111,7%. Разработанным методом проанализировано 106 проб молока. Концентрация НМ выше 100 нг/мл выявлена в 57 из них, выше 500 нг/мл – в 11, выше 1500 нг/мл – в 1. НМ даже в наименее чувствительном варианте анализа выявлялся в молоке без специальной пробоподготовки при 100-кратном разведении