The specific features of the reproduction of the bovine coronavirus strain VNIIZh in the continuous RBT cell culture | Особенности репродукции корона вируса крупного рогатого скота штамм "ВНИИЗЖ" в перевиваемой культуре клеток RBT

English. An effective cultivation system of bovine coronavirus reducing the production costs for producing virus containing material for manufacturing vaccine and diagnostic preparations has been selected. The comparative studies of coronavirus reproduction (strain ARRHIAH) in cell cultures (CC) MDBK, Taurus-2 and RBT (Rene BOS Taurus L) have shown the cultivation time: 72-96; 48-72 and 48 h, respectively, and hemagglutination activity 7.0, 8.0 and 8.0-9.0 log2. A role tube method of cultivating the coronavirus allowed reducing the multiple infections compared to the stationary method and increasing the titer of hemagglutination activity by 1.0-2.0 log2 for 4 passages. The properties of cytopathic effect of coronavirus, and CC RBT allowed performing a single freezing-thawing of a viral suspension in culture tubes, as well as to use a cell line RBT to determine infectious activity of the virus-containing material reproduced in other CC. So, CC RBT produced by adding a 1% fetal bovine blood serum was more sensitive when titrating bovine coronavirus than when adding a 5% native bovine blood serum containing no virus-specific antibodies. Thus, the results of the investigation have shown reducing the time of cultivating the bovine coronavirus by 24-48 h, increasing the hemagglutination activity by 1.0-2.0 log2, affecting the monolayer in roll tubes by 70-80%, hemagglutination activity of coronavirus after a single freezing 10.0-12.0 log2

Russian. Подобрана эффективная система культивирования (КЛ) коронавируса (КВ) КРС, снижающая производственные затраты при получении вируссодержащего сырья (исключен этап концентрирования) для изготовления вакцинных и диагностических препаратов. Сравнительные исследования репродукции КВ (штамм "ВНИИЗЖ") в культурах клеток (КК) MDBK, Taurus-2 и RBT показали время культивирования: 72-96; 48-72 и 48 ч соответственно, и гемагглютинирующую активность (ГА) 7,0; 8,0 и 8,0-9,0 log2. Роллерный метод КЛ КВ позволил снизить множественность заражения по сравнению со стационарным методом с 5-10 до 1-5 инфекционных единиц на клетку и повысить титр ГА на 1,0-2,0 log2 в течение 4 пассажей. Особенности цитопатического действия КВ и КК RBT позволили проводить однократное замораживание - оттаивание вирусной суспензии в культуральных сосудах, а также использовать клеточную линию RBT для определения инфекционной активности вируссодержащего материала, репродуцированного в др. КК. Так, КК RBT, полученная с добавлением 1%-ной фетальной сыворотки крови КРС, оказалась более чувствительной (0,5-1,0 lg ТЦИД50/см3) при титровании КВ КРС, чем при добавлении 5%-ной нативной сыворотки крови КРС, не содержащей вирусспецифических антител. Т.о., показано: сокращение времени КЛ КВ КРС на 24-48 ч, повышение ГА-активности на 1,0-2,0 log2, поражение монослоя в роллерных сосудах на 70-80%, ГА-активность КВ после однократного промораживания - 10,0-12,0 log2 и концентрация вирусных частиц - 108,5-109,0 частиц/куб.см.