Creating a test system based to assess the state antybrucellosis immunity | Создание тест-системы для оценки противобруцелезного иммунитета

English. The role of cytokines, colony stimulating factor (CSF) and tumor-necrotic factor (TNF) in developing anti-brucellosis immunity at the background of using different vaccine Brucella strains was studied. A capability of different radioantigens of Brucella (cytokine inducers) from strains Brucella abortus 19, R-1096, 82 and 82 Pch, 82-ts, 54, RB-51 and 19 US to synthesize immunogenesis mediators in a cell model incubated cells of peripheral blood in vitro. The obtained preparations were tested for the ability to stimulate producing cytokines, spontaneous and induced. The results of determining spontaneous and stimulated secretion with mononuclear leucocytes of peripheral blood of such cytokines as IL-6 and G-CSF have shown that over 6 h of incubation their secretion into an incubation medium (supernatant) was 6.5 and 9.7 PG/ml, respectively. The EIA method has found that the ability of cells of peripheral blood stimulated by Brucella antigens to synthesize IL-6 and G-CSF was higher than in non-stimulated blood cells. The results of immunohistochemical studies of cytokine concentration in blood serum immunized with different animal vaccines coincided with those in vitro of the test system. It is concluded that the cytokine-inducing activity of cytokine inducers is advisable to evaluate in the in vitro test system by incubating lymphocytes in the presence of the tested substances and determining in supernatants the content of cytokines in EIA.

Russian. Изучена роль цитокинов (ЦК) интерлейкина-6 (ИЛ-6), колониестимулирующего фактора (G-CSE) и туморнекротического фактора a (TNF-a) в формировании противобруцеллезного иммунитета на фоне применения разных вакцинных штаммов (ШТ) бруцелл (БЦ). Определена способность разных радиоантигенов БЦ (индукторов ЦК) из ШТ Brucella abortus 19, R-1096, 82 и 82-Пч, 82-ц, 54, RB-51 и 19 США синтезировать медиаторы иммуногенеза в клеточной модели - инкубируемых клетках периферической крови in vitro. Полученные препараты были испытаны на способность их стимулировать продукцию ЦК (IL-6, TNF-a, G-SCF) спонтанную и индуцированную. Результаты определения спонтанной и стимулированной секреции мононуклеарами периферической крови таких ЦК, как IL-6 и G-CSF показали, что за 6 ч инкубирования секреция их в инкубационную среду (супернатант) составила 6,5 и 9,7 пг/мл соответственно. При исследовании проб-супернатантов из нестимулированных и стимулированных антигенами клеток методом ИФА установлено, что способность клеток периферической крови, стимулированных антигенами БЦ, синтезировать IL-6 и G-CGF была выше, чем у нестимулированных клеток крови. Наиболее активными были бруцеллезные антигены из ШТ: 54; 82; 82-Пч и 82-ц. Причем, 82-Пч, 82 и 82-ц усиливали индукцию TNFa, IL-6 и G-CGF, 19 - G-CGF (138,8 пг/мл); 19 США - TNF-a (31,8 пг/мл), R-1096 - IL-6 (125,5 пг/мл). Т.о., по способности усиливать синтез иммунорегулирующих ЦК (TNF-a, IL-6 и G-CGF) в модельной in vitro тест-системе, испытанные радиоантигены из ШТ БЦ, расположились по убывающей: 8282-Пч82-ц19R-109619 США. Результаты иммуногистохимических исследований конц-ии ЦК в сыворотке крови иммунизированных разными вакцинами животных совпадали с таковыми in vitro тест-системы. Делается вывод, что стимулирующую активность индукторов ЦК целесообразно оценивать в in vitro тест-системе путем инкубирования лимфоцитов в присутствии испытуемых в-в и определения в супернатантах содержания ЦК в ИФА.