Evaluación de tres protocolos de extracción ADN en insectos del orden Thysanoptera
2011
Rodríguez, A., Universidad de Guantánamo Cuba | Posos, P., Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Universidad de Guadalajara México | Peteira, B., Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, La Habana Cuba | Suris, M., Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, La Habana Cuba
Spanish; Castilian. Con el objetivo de evaluar la eficiencia de la extracción del ADN genómico a partir de insectos del Orden Thysanoptera, se evaluaron tres protocolos. Como material se utilizaron adultos de los géneros Frankliniella Karny y Thrips Linneaus conservados en etanol al 70 por ciento. La eficiencia se midió a través de la amplificación de la región ITS en una PCR multiplex, utilizando los cebadores ITS1, ITS2, CS249 y CS250. El producto de la PCR se separó por electroforesis en un gel de agarosa al 1 por ciento. Se demostró que a partir del protocolo de Aljanabi y Martínez no hubo amplificación, mientras que con los protocolos de Rugman y Moritz se obtuvieron patrones de bandas nítidas, lo que demuestra que ambos procedimientos pueden ser utilizados para realizar las extracciones de ADN.
Show more [+] Less [-]English. Three protocols were tested to evaluate the efficiency of the genomic DNA extraction from insects of the Order Thysanoptera. Ethanol preserved adults of the Genera Frankiniella Karny and Thrips Linneaus were used as the material for the extraction. The efficiency was measured through the amplification of the ITS region in a multiplex PCR assay using the primers ITS1, ITS2, CS249 and CS250. The PCR product was separated by electrophoresis on 1 percent agarose gel. It was demonstrated that no amplification was obtained following the protocol of Aljanabi and Martínez, whereas the protocols described by Rugman and Moritz showed well defined band patterns, suggesting that both procedures can be used for the DNA extractions.
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Bibliographic information
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