Alternative methods of preparation of fish sperm to freeze at ultra-high values of cooling rate | Альтернативные способы подготовки сперматозоидов рыб к замораживанию при сверхвысоких значениях скорости охлаждения

Russian. Объект исследований – половые продукты русского осетра (Acipenser gueldenstaedtii Brandt, 1833), сибирского осетра ленской популяции (Acipenser baerii Brandt, 1869) и белорыбицы (Stenodus leucichthys Guldenstadt, 1772). Изучали возможность замораживания мужских репродуктивных клеток осетровых рыб при сверхвысоких значениях скорости охлаждения в виде "тонких пленок" на пластиковых или алюминиевых сетках, а также путем предварительного высушивания мазка спермы в термостате при температуре 20, 27 или 35 град. С в течение 12, 23 или 5-6 мин. Оттаивание проводили при 20 град. С. При замораживании семенной жидкости рыб в виде "тонкой пленки" время жизни сперматозоидов после дефростации во всех опытных образцах составило больше 14 минут. Это указывает на эффективность применения данного способа подготовки семенной жидкости к низкотемпературному консервированию и на пригодность замороженно-оттаянных репродуктивных клеток для рыбоводных целей. Наибольшее время жизни сперматозоидов как русского, так и сибирского осетров отмечено при замораживании на пластиковых сетках. При подготовке к криоконсервации путем предварительного высушивания мазка спермы в термостате оптимальным является режим 20 град. С, 5-6 мин. После размораживания среднее время жизни сперматозоидов составило 41 с, при этом наблюдали колебательные движения лишь у 20% замороженного материала, остальные клетки сильно пострадали от обезвоживания. Этот способ подготовки клеток к криоконсервации рассматривается как перспективный, но требующий доработки и совершенствования.

English. The sexual products of the Russian sturgeon (Acipenser gueldenstaedtii Brandt, 1833), the Siberian sturgeon of Lena population (Acipenser baerii Brandt, 1869) and white salmons (Stenodus leucichthys Guldenstadt, 1772) were used as an object of this research. Studied was the possibility of freezing of fish reproductive male cells of sturgeon fishes in the form of "thin films" on plastic or aluminum meshes at ultra-high cooling rates, and also by preliminary drying of a sperm smear in the thermostat at temperature of 20, 27 or 35 degrees C for 12, 23 or 5-6 min. Defrosting was carried out at 20 deg. C. When freezing fish semen in the form of a "thin film" the lifespan of spermatozoids after defrostation in all experimental samples was more than 14 minutes. It points to the efficiency of application of this method of preparation of sperm to cryopreservation and the suitability of frozen-thawed reproductive cells for aquaculture purposes. The highest spermatozoa lifespan of both Russian and Siberian sturgeons is detected when freezing on plastic meshes. In preparation for cryopreservation by preliminary drying of a sperm smear in the thermostat the mode 20 deg. C, 5-6 min is optimal. After defrosting the mean lifespan of spermatozoids was 41 s, there were observed fluctuating motions only in 20% of frozen material, the rest of the cells strongly suffered from dehydration. This method of preparation of cells for cryopreservation is considered as promising, but requiring modification and improvement.