The study of fractionation of wheat bran fermentative hydrolysate with Amberlite XAD-4 | Исследование процесса фракционирования ферментативного гидролизата пшеничных отрубей на Амберлите XAD-4

Russian. Ферулоилированные олигосахариды (ФОС) известны как соединения, эффективные в профилактике рака кишечника. Изучали их выделение из пшеничных отрубей. Проведено фракционирование гидролизатов растительных субстратов на полистирольных адсорбентах. Предварительно очищенные от крахмала и белка пшеничные отруби ферментировали, и гидролизат пропускали через колонку с полистирольным адсорбентом Амберлит XAD-4. Колонку последовательно промывали водой, смесью вода - спирт (1:1) и спиртом для элюции моно/олигосахаридов, ФОС и свободной феруловой кислоты (ФК) соответственно. Количественное содержание во фракциях связанной и свободной ФК определяли методом Фолина - Чокальтеу (в пересчете на ФК), количественное содержание свободной ФК - методом капиллярного электрофореза. Качественное содержание свободной и связанной ФК во фракциях проводили методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). Было установлено, что на Амберлите XAD-4 происходит разделение моно/олигосахаридов, ФОС и свободной ФК по фракциям. Этанол при элюировании фракции ФОС и свободной ФК оказался более эффективным, чем метанол. Водная фракция содержала незначительное количество связанной ФК, водно-спиртовая фракция - преимущественно связанную ФК, а спиртовая фракция - свободную. Установлено также, что ФК и ее производные хроматографировались при первом пропускании через колонку. Упаренные фракции подвергались анализу методом ТСХ на пластинках Silicagel 60 F254, после обработки парами аммиака в водноспиртовой фазе под УФ-светом пятна приобретали светло-зеленую флуоресценцию, что, по литературным данным, соответствует ФОС.

English. Feruloyl-oligosaccharides (FOS) are known as compounds, effective in prevention of an intestines cancer. Its allocation from wheat bran was studied. Fractionation of hydrolysates of plant substrates on polystyrene adsorbents was carried out. Wheat bran cleared of starch and proteins were fermented, and the hydrolysate obtained was passed through a column with Amberlite XAD-4 polystyrene adsorbent. The column was successively washed with water, water-alcohol mixture (1:1) and alcohol for elution of mono/oligosaccharides, FOS and free ferulic acid (FA), respectively. The quantitative content of bound and free FA in the fractions was determined using the method of Folin-Ciocalteu (in application to FA), and the quantitative content of free FA was determined with the help of capillary electrophoresis. Qualitative content of free and bound FA in the fractions was determined by thin layer chromatography (TLC). It has been found that Amberlite XAD-4 fractionnates mono/oligosaccharides, FOS and free FA. Ethanol has shown itself more effective than methanol in elution of fractions of FOS and free FA. Water fraction contained a small amount of bound FA, water-alcohol fraction contained mainly bound FA, and alcohol fraction contained free one. It has been also determined that FA and its derivatives are chromatographed during the first passage through the column. The evaporated fractions were analyzed by TLC on plates of Silicagel 60 F254. After exposure to ammonia vapors in the hydro alcoholic phase under UV light, spots acquired light green fluorescence, which corresponds to the description of FOS in literature.