METHOD OF SETTING INCREASING REACTION OF BACTERIOPHAGE TITER BACILLUSANTHRACIS

оптимальное время экспозиции - 5 часов культивирования без предварительного подращивания исследуемого материала. Практическая значимость работы определяется подбором технологических режимов культивирования и концентраций индикаторной культуры и сибиреязвенного бактериофага, позволяющими адаптировать методику реакции нарастания титра фага к конкретному бактериофагу.

Russian. optimal exposure time - 5 hours of cultivation without preliminary understudy material rearing. The practical significance of the work is determined by the selection of technological modes of cultivation and concentration of the indicator culture and anthrax bacteriophage, which allows to adapt the method of bacteriophage titer increasing reaction to specific bacteriophage.

В специальной литературе описано несколько методов по индикации Bacillus anthracis, основанных на применении специфических бактериофагов. Для выявления возбудителя сибирской язвы используют следующие методы фагоиндикации: реакция нарастания титра фага (РНФ), реакция адсорбции фага (РАФ), фаготетразоловый метод (ФТМ) и люминесцентно-серологический метод (ЛЮМ). Сущность РНФ заключается в следующем: если в исследуемом материале присутствует искомый вид бактерий, то искусственно введенный в него гомологичный бактериофаг в определенной концентрации с коротким циклом внутриклеточного развития, адсорбируется на нем, затем размножится. Таким образом, последующее увеличение концентрации (повышение титра) свободного внеклеточного фага, по сравнению с контролем, указывает на присутствие в исследуемом материале гомологичного возбудителя. В статье описаны результаты исследований по подбору оптимальных параметров постановки реакции нарастания титра фага с сибиреязвенным бактериофагом (количественный показатель реакции, имеющий диагностическое значение, и оптимальное время, обеспечивающее полноценное взаимодействие фага с бактериями). Установлено, что наиболее эффективными для постановки РНФ с целью индикации бактерий Bacillus anthracis в объектах санитарного надзора, являются следующие параметры: концентрация индикаторной культуры Bacillus anthracis, обнаруживаемая при постановке реакции – 103м.к./мл, рабочее разведение бактериофага - 105 БОЕ/мл

English. The literature describes several methods for detection of Bacillus anthracis based on application of specific bacteriophages. The following methods of pahoinpitely are used to identify the causative agent of anthrax: the reaction of bacteriophage titer growth (RBTG), the reaction of phage adsorption (RPA), fagoterapii method (FTM) and fluorescent-serological method (FSM). The essence of RBTG consists in the following: if there is the researchform of bacteria presents in the test material, then artificially inserted into it homologous bacteriophage in a certain concentration with short intracellular development cycle, adsorbs on it, and then multiply. Thus, the subsequent concentration gain (raising titer) of extracellular free phage compared to the control, indicates the presence of homologous pathogen in the studied material. The article describes the results of research on selection of optimal parameters of increasing bacteriophage titer reaction to anthrax bacteriophage (quantitative reaction with diagnostic value, and the optimal time of achieving a full interaction of phage with bacteria). It was established that the most effective for RBTG production for the purpose of Bacillus anthracis bacteria indication in sanitary supervision objects, are the following parameters: concentration of the tracer culture Bacillus anthracis, detectable by reaction staging – 103m.k./ml, working dilution of the bacteriophage - 105 PFU/ml