Investigation of various ways of preparation of samples of casein for the immunofermental analysis of Chloramphenicol
2015
Poznyak,T.A. | Vashkevich,I.I. | Sviridov,O.V.
English. Several methods of sample preparation for a chloramphenicol enzyme immunoassay in casein have been studied. The methods comprised separately or collectively the steps of protein dissolution in alkaline media, denaturing agent addition and proteolysis followed by immunoadsorption or extraction. Protein solubility and the viscosity of the solutions as well as a background signal of a non-contaminated specimen, chloramphenicol recovery and enzyme immunoassay data repeatability served as the efficiency criteria of the approaches used. It was found that a procedure which included the immunoadsorption of chloramphenicol from the solution of enzymatically digested casein could be used for antibiotic detection when its high concentrations were expected. At the same time, it was shown that a technique based on the extraction of chloramphenicol with ethyl acetate from a solution of casein in 0.5 M NaOH met the veterinary medicine requirements to the methods of measurement of residual chloramphenicol in products of animal origin and provided the quantitative determination of this antibiotic in a range of 0.1 to 10.0 mg/kg.
Show more [+] Less [-]Russian. Исследованы несколько способов подготовки проб для иммуноферментного анализа хлорамфеникола в казеине, которые включали раздельно или в комбинациях растворение белка в щеточных средах, добавление денатурирующего агента, протеолиз с последующей иммуноадсорбцией или экстракцией. Критериями эффективности использованных подходов служили растворимость белка и вязкость его растворов, а также фоновое значение в холостом образце, извлечение (открытие) хлорамфеникола и повторяемость результатов измерений при ИФА. Установлено, что методика, включающая иммуноадсорбцию хлорамфеникола из раствора казеина после ферментативного гидролиза, может использоваться для обнаружения антибиотика при его ожидаемых высоких концентрациях. В то же время показано, что методика, основанная на экстракции хлорамфеникола этилацетатом из раствора казеина в 0.5 М NаОН, удовлетворяет требования к методам измерения содержания остаточных количеств Хф в продукции животного происхождения и обеспечивает количественное определение данного антибиотика в казеине в диапазоне концентраций от 0.1 до 10.0 мкг/кг.
Show more [+] Less [-]AGROVOC Keywords
Bibliographic information
This bibliographic record has been provided by National Academy of Sciences of Belarus