Definition of fenbendazole and its metabolites in milk by the method of liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry | Определение фенбендазола и его метаболитов в молоке коров методом жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием

English. There have been developed methods for the determination of fenbendazole and its metabolites in milk by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry. Fenbendazole was administered orally to five cows. Samples of milk were taken on 1, 3, 5 and 10 days of administration of Vigisox drug. Mass-spectrometric conditions for analysis of fenbendazole and its derivatives: electrospray ionization in a positive regine (ESI+), ionization temperature 350 deg. C, gas flow 10l/min, pressure of nebulizer 40 psi, pressure +/- 5000 V. The mobile phase: of eluent consisted of 0.1% solutions of formic acids in water and in acetonitrile (volume ratio was 3:2).when preparing milk samples as solvents acetonitrile and saturated ammonia solution were used. Extraction was carried out with ethyl acetate. Using standard samples of the preparation the desired conditions were determined for chromatography: eluent delivery rate- 0.2 ml/min, sample volume – 5 mcl, thermostat temperatures of column and auto-sampler – 30 and 4 deg. C, respectively. Retention time of fenbendazole – 2.5 min, sulfone – 1.5 min, sulfoxide – 1.0 min. Detection limits of fenbendazole and its derivatives were 0.3 ng/ml, quantitative determination – 0.9 for fenbendazole and 1.1 ng/ml for derivatives (sulfone and sulfoxide). The linearity range is 5-2500 ng/ml. The maximal concentrations of fenbendazole and its metabolites in cow milk were detected 24 h after drug administration and were 22.6 ng/ml for sulfone fenbendazole, 34.0 ng/ml for sulfoxide fenbendazole and 19.7 ng/ml for fenbendazole. 10 days after administration, the concentrations of fenbendazole and its metabolites in milk did not exceed allowable values.

Russian. Разработана методика определения фенбендазола (ФА) и его метаболитов в молоке коров методом жидкостной хроматографии высокого давления с последующим масс-спектрометрическим детектированием. ФА назначали 5 коровам в дозе 4,8 мг/кг перорально. Пробы молока отбирали через 1, 3, 5 и 10 сут после введения препарата вигисокс. Масс-спектрометрические условия анализа ФА и его производных: ионизация электроспреем в положительном режиме (ESI+), температура ионизации 350 град. С, поток газа 10 л.мин, Давление небулайзера 40 psi, напряжение +/- 5000 B. Подвижная фаза элюента состояла из 0,1%-ных растворов муравьиной кислоты в воде и в ацетонитриле (соотношение объемов 3:2). При подготовке проб молока в качестве растворителей использовали ацетонитрил и насыщенный раствор аммиака. Экстракцию проводили этилацетатом. С помощью стандартных образцов препарата определены оптимальные условия хроматографирования: скорость подачи элюента 0,2 мл/мин, объем пробы 5 мкл, температуры термостатов колонки и автосемплера – 30 и 4 град. С соответственно. Время удерживания ФА – 2,5 мин, сульфона – 1,5 мин, сульфоксида – 1,0 мин. Пределы обнаружения ФА и его производных составили 0,3 нг/мл, количественного определения 0,9 для ФА и 1,1 нг/мл для производных (сульфона и сульфоксида). Диапазон линейности- 5-2500 нг/мл. Максимальные концентрации ФА и его метаболитов в молоке коров обнаружены через 24 ч после введения препарата и составили 22,6 нг/мл для ФА сульфона, 34,0 нг/мл для ФА сульфоксида и 19,7 нг/мл для ФА . Спустя 10 сут после введения препарата содержание ФА и его метаболитов в молоке коров не превышало максимально допустимых значений.