Preparation of chlamydial specific antibodies using BALB/c inbred mice | Получение хламидийных антител с использованием инбредных мышей линии BALB/c

English. Animal chlamydia is an infectious disease that leads to abortion and infertility. Typically, the disease is caused by bacteria of the family Chlamydiaceae of zoonotic nature, mainly Chlamydia psittaci, but may also be caused by Chlamydia trachomatis, which earlier was regarded as only an anti-human Chlamydia agent. This makes animal Chlamydia a threat to the health of people in contact with infected animals. To obtain Chlamydia antibodies, there were used inbred mice BALB/c and highly purified antigens that are syngeneic with respect to the Sp.2/0-Ag.8 myeloma cells. To stimulate the formation of ascites, immune mice pre-primed with mineral oil Pristane were inoculated with syngeneic myeloma Sp2/0-Ag.8 line. The titers of obtained monospecific antibodies (mAb) were tested in indirect ELISA, the specificity - in the dot-immunoassay. As positive and negative controls to assess the specificity of the experimental mAb there were used whole blood and heparinized blood, scrapings from the mucous membranes of the vagina and nose of knowingly healthy sheep and from aborted sheep with chlamydia. An experimental biotechnology of obtaining a preparative number of Chlamydia mAb as a basis for constructing modern immunoassays for the detection of Chlamydia psittaci bacteria or a mixed infection caused by Chlamydia psittaci + Chlamydia trachomatis. Compared with the production of monoclonal antibodies, the advantages of this biotechnology are characterized by low labor intensity of the process, a significant (up to 14 days) reduction in time of preparation of a preparative number of antibodies, a significant reduction in the prime cost of immunobiological raw materials, eqaul in quality to monoclonal immunoglobulins. The use of immunotests designed on the basis of mAb will allow carrying out a direct indication of the pathogen in the clinical material of agricultural animals with Chlamydia.

Russian. Хламидиоз животных – инфекционное заболевание, приводящее к абортам и бесплодию. Как правило, болезнь вызывается бактериями семейства Chlamydiaceae зоонозной природы, в основном Chlamydia psittaci, но может быть вызвана и бактерией Chlamydia trachomatis, которая ранее считалась возбудителем хламидиоза только у человека. Это делает хламидиоз животных угрозой для здоровья людей, контактирующих с инфицированными особями. Для получения хламидийных антител использовали сингенных по отношению к миеломным клеткам Sp.2/0-Ag.8 мышей инбредной линии BALB/c и высокоочищенные антигены. Для стимулирования асцитообразования иммунным мышам, предварительно праймированным минеральным маслом "Pristane", инокулировали сингенную миеломную линию Sp2/0-Ag.8. Титры полученных моноспецифических антител (МонАТ) исследовали в непрямом твердофазном иммуноферментном анализе, специфичность – в дот-иммуноанализе. В качестве положительных и отрицательных контролей для оценки специфичности экспериментальных МонАТ использовали цельную и гепаринизированную кровь, соскобы со слизистых влагалища и носа от заведомо здоровых и больных хламидиозом абортировавших овец. Предложена экспериментальная биотехнология получения препаративного количества моноспецифических хламидийных антител как основы конструирования современных иммунотестов для выявления бактерий Chlamydia psittaci или смешанной инфекции, вызванной Chlamydia psittaci + Chlamydia trachomatis. Преимущества разработанной технологии по сравнению с производством моноклональных антител: низкая трудоемкость процесса, значительное (до 14 дней) сокращение сроков получения препаративного количества антител, существенное снижение себестоимости иммунобиологического сырья, не уступающего по качеству моноклональным иммуноглобулинам. Применение иммунотестов, сконструированных на основе МонАТ, позволит проводить прямую индикацию возбудителя в клиническом материале больных хламидиозом с.-х. животных.